1 基因克隆技术摘要： 基因克隆技术是分子生物学的核心技术，其目的是获得某一基因或DNA片段的大量拷贝， 用于深入分析基因的结构与功能，并可达到人为改造细胞以及物种遗传性状的目的。 本论文主要从以下几个方面来介绍基因克隆技术：目的基因的获得、目的基因和载体的连接、重组分子的扩增和鉴定。关键词： 目的基因；限制性内切酶；克隆；重组分子ABSTRACT ： Gene cloning technology is the core of molecular biology technology, its purpose is obtain a gene or DNA fragments of the copy, used for in-depth analysis the structure and function of genes, and may achieve human cells and the transformation of the species genetics purpose.This thesis mainly from the following several aspects to introduce gene cloning technology: the purpose of the gene for the purpose, genes and carrier, restructuring of the molecules connected amplification and identification.Keywords： purpose gene;restriction endonuclease;clone;restructuring molecules 基因克隆是 70年代发展起来的一项具有革命性的研究技术，可概括为∶分、切、连、转、选。“分”是指分离制备合格的待操作的DNA，包括作为运载体的DNA和欲克隆的目的 DNA；“切”是指用序列特异的限制性内切酶切开载体DNA，或者切出目的基因； “连”是指用DNA连接酶将目的 DNA同载体 DNA连接起来，形成重组的 DNA分子；“转”是指通过特殊的方法将重组的DNA分子送入宿主细胞中进行复制和扩增； “选”则是从宿主群体中挑选出携带有重组DNA分子的个体。基因克隆技术包括把来自不同生物的基因同有自主复制能力的载体DNA在体外人工连接，构建成新的重组DNA，然后送入受体生物中去表达，从而产生遗传物质和状态的转移和重新组合。1. 目的基因的获得目的基因是指所要研究或应用的基因，也就是将要克隆或表达的基因。 获得目的基因是分子克隆过程中最重要的一步。基因工程流程的第一步就是获得目的DNA片段 , 。所需目的基因的来源, 不外乎是分离自然存在的基因或人工合成基因。常用的方法有 PCR 法、化学合成法、 cDNA法及建立基因文库的方法来筛选[1]1.1 PCR 方法2 1.1.1 PCR PCR 是一种在体外快速扩增特定基因或DNA[2] 。聚合酶链式反应 （PCR）是...
