基孔肯雅热实验室检测方案基孔肯雅病毒（Chikungunya Virus，CHIKV）属于披膜病毒科甲病毒属，病毒直径约70nm，有包膜，含有3 个结构蛋白（衣壳蛋白C、包膜蛋白 E1 和 E2）和 4 个非结构蛋白（nsP1、nsP2、nsP3 和 nsP4）。CHIKV 的基因组为不分节段的正链RNA，长度约为11-12kb 。病毒基因组编码顺序为5’－NS1－NS2－NS3－NS4－C－E3－E2－E1－3’。通过病毒部分E1 基因的系统发生分析可将基孔肯雅病毒可分为3 个组；第 1 组包含了全部西非的分离株，第2 组是亚洲分离株，东、中、南部非洲的分离株构成了第3 组。CHIKV可在 Vero、C6/36、BHK-21 和 HeLa等细胞中繁殖并产生病变，并可感染除人外的灵长类、乳鼠等动物。一、标本的采集和保存（一）血清。急性期血清：无菌采集静脉血2～5ml（非抗凝血），一般情况下，发病后2 日内血清可用于病毒分离，发病后5 日内血清可用于CHIKV核酸检测和血清学检测。恢复期血清：静脉血2～5ml（非抗凝血），无菌采集，与急性期血清间隔时间为2～3 周。采血后，低温保存并尽快运送至实验室分离血清，以便及时进行血清学或病原学检测。不能及时检测的血清可置于-70 ℃保存，尽量避免反复冻融。（二）伊蚊。在本病暴发或流行期间，采集家庭内或外环境中伊蚊成蚊、幼虫，用于病原学检测。二、标本的运输按照卫生部《人间传染的病原微生物名录》的规定，CHIKV 的危害程度属第二类病原微生物，血清和伊蚊标本应采用 A 类包装（编号：UN 2814），干冰运输。三、实验室特异性检测方法目前，基孔肯雅热的实验室检测方法主要有3 种：病毒分离、核酸检测和血清学检测。按照卫生部《人间传染的病原微生物名录》的规定，病毒分离应在BSL－3 级实验室中进行，灭活血清、伊蚊冻存标本的核酸和血清学检测可在BSL－2 级实验室中。（一）血清学检测方法。1．特异性 IgM 检测目前较多采用的方法有： IgM 捕获 ELISA法（MacELISA）、间接 ELISA 法和 IgM 捕获法胶体金标记（或其他标记）免疫层析试纸条等。一般情况下， IgM 抗体发病后1 天开始出现，发病后5天多数患者呈阳性。第 3 页 共 4 页2．特异性 IgG 检测（急性期、恢复期双份血清）目前较多采用的方法有：间接ELISA 法、免疫荧光法和胶体金标记（或其他标记）免疫层析试纸条等。一般情况下， IgG 抗体发病后2 天开始出现，发病后5天多数患者呈阳性。3．意义（1）IgM 阳性结果，表明患者新近CHIKV感染，用于基孔肯雅...
