基孔肯雅热实验室检测方案基孔肯雅病毒(Chikungunya Virus,CHIKV)属于披膜病毒科甲病毒属,病毒直径约70nm,有包膜,含有3 个结构蛋白(衣壳蛋白C、包膜蛋白 E1 和 E2)和 4 个非结构蛋白(nsP1、nsP2、nsP3 和 nsP4)
CHIKV 的基因组为不分节段的正链RNA,长度约为11-12kb
病毒基因组编码顺序为5’-NS1-NS2-NS3-NS4-C-E3-E2-E1-3’
通过病毒部分E1 基因的系统发生分析可将基孔肯雅病毒可分为3 个组;第 1 组包含了全部西非的分离株,第2 组是亚洲分离株,东、中、南部非洲的分离株构成了第3 组
CHIKV可在 Vero、C6/36、BHK-21 和 HeLa等细胞中繁殖并产生病变,并可感染除人外的灵长类、乳鼠等动物
一、标本的采集和保存(一)血清
急性期血清:无菌采集静脉血2~5ml(非抗凝血),一般情况下,发病后2 日内血清可用于病毒分离,发病后5 日内血清可用于CHIKV核酸检测和血清学检测
恢复期血清:静脉血2~5ml(非抗凝血),无菌采集,与急性期血清间隔时间为2~3 周
采血后,低温保存并尽快运送至实验室分离血清,以便及时进行血清学或病原学检测
不能及时检测的血清可置于-70 ℃保存,尽量避免反复冻融
在本病暴发或流行期间,采集家庭内或外环境中伊蚊成蚊、幼虫,用于病原学检测
二、标本的运输按照卫生部《人间传染的病原微生物名录》的规定,CHIKV 的危害程度属第二类病原微生物,血清和伊蚊标本应采用 A 类包装(编号:UN 2814),干冰运输
三、实验室特异性检测方法目前,基孔肯雅热的实验室检测方法主要有3 种:病毒分离、核酸检测和血清学检测
按照卫生部《人间传染的病原微生物名录》的规定,病毒分离应在BSL-3 级实验室中进行,灭活血清、伊蚊冻存标本的核酸和血清学检测可在