1、细胞培养上清：即在4℃下，首先 300×g 离心 10 min，吸取上清液，然后 2 000 ×g 离心 10 min ；吸取上清液后， 10 000×g 高速离心 30 min ，吸取上清液； 140000×g 超速离心 90 min ；除去上清液，所获得的沉淀即为外泌体
用PBS缓冲液洗涤沉淀并重悬后， 140 000×g 再次离心 90 min ，100 μ L PBS缓冲液重悬沉淀，冻存于 - 80℃备用
2、将小鼠或人血收集在1
5mL 管中，并使其在37℃下凝结 1 小时而不进行抗凝
此后，将其以 2,000 ×g 离心持续 10 分钟获得血清
接着将血清以 3,000 ×g 离心 10 分钟
将上清液以无菌 PBS以 1：1 的比例稀释并离心再次以10,000×g 保持 30 分钟，然后以 200,000×g 进行 2 小时超速离心
将颗粒在 a中洗涤大量 PBS，通过 0
2- μ m注射器过滤器过滤，并以200,000×g 离心 1 小时，然后收集沉淀并重悬于PBS或 PBS中用于后期功能或生化测定的培养基
3、为了从体液（例如尿液，支气管肺泡灌洗液， 血清，血浆，肿瘤腹水）中纯化外泌体，只需通过常规方法收集液体即可
血浆用紫色的管子，EDTA抗凝，血清的话不抗凝直接离心
在4° C 下在玻璃瓶中储存长达 5 天，直至进行外泌体纯化
外泌体纯化的原理与从组织培养条件培养基开始时的原理相同，但由于某些流体的粘度，必须稀释它们，并增加离心的速度和长度
该方案已在作者的实验室中用于从人血浆中纯化外泌体（Caby等，2005）
基本方案 1 中指出的所有预处理也适用于该方案
材料液体（例如，血浆：通过 Ficoll离心与血细胞分离 ; 淋巴，血清，尿液，细支气管灌洗或肿瘤腹水）磷酸盐缓冲盐水（PBS;附录） 2A）冷冻离心机50 毫升聚丙烯离心管0
