第一部分 神经生物学的形态学研究方法一、研究神经细胞的形态及细胞构筑的方法（一）尼氏（Nissl）染色法原 理 用碱性染料染神经组织常用染料 焦油紫、硫堇、中性红结 果 尼氏小体被染色，背景无色。用 途 皮质的分层、分区、脊髓灰质的分层、核团的分区、细胞的构筑（二）高尔基（Golgi）镀银染色法原 理 铬银与脂蛋白形成复合物，在细胞 膜系统的间隙内形成结晶结 果 整个细胞为黑色用 途 显示整个细胞的全貌二、研究神经径路的方法（一）溃变法原理 神经元胞体或纤维损伤后远侧部分发生顺行变性（纤维交替膨胀和狭窄，呈念珠状继而呈颗粒状），可用镀银法显示或电镜观察。 胞体发生逆行变性（胞体内色质溶解，胞体肿胀，核偏向胞体的一边），可用尼氏法显示。应用 研究纤维联系。（二）辣根过氧化物酶（HRP）标记法原 理 HRP 注入神经组织或脏器—逆行、顺行、 过节标记—H2O2、色原酶反应—呈色试 剂 HRP： 1.游离 HRP 2.结合 HRP(WGA-HRP、CT-HRP） 色原： 1.二氨基联苯胺(DAB) 2.二盐酸联苯胺(BDHC) 3.邻-联茴香胺(OD) 4.四甲基联苯胺(TMB) 稳定剂: 硝普钠、钨酸钠用 途 研究脏器的神经支配、中枢内核团间的联系等。还可与免疫组织化学、电镜技术等结合。（三）荧光素轴突逆行传递标记法原 理 将荧光物质注射至神经元的轴突分布区, 经分支的末梢吸收后，循轴突逆行输送至胞体。在荧光显微镜 下可看到胞体内呈现荧光标记物。荧光素 Furogold FB-NY GB-NY TB-Bb PI-Bb EB-DAPA应 用 研究神经元的轴突分支至不同部位的投射。（四）放射自显影示踪技术原 理 将放射性同位素 3H 等标记的氨基酸导入神经组织，氨基酸被神经元摄取后在胞体内合成蛋白质，沿轴突顺行运输，分布于整轴突和末梢，同位素产生的核射线使照相乳胶感光，根据感光银粒所在部位和黑度判断放射性示踪剂的位置和数量，从而确定神经纤维的路径。 示踪剂 3H -脯氨酸 标记终末、跨突触标记 3H -亮氨酸 标记终末、纤维 3H -HRP 酶蛋白 与 HRP 结合双标记 用 途 研究神经元的传出路径（五）2-脱氧葡萄糖放射自显影法原 理 2-DG 能与葡萄糖竞争和 6-磷酸葡萄糖异构酶结合，但不能转化为相应的磷酸果糖，因此滞留在细胞中。将 2-DG 标记上放射性同位素，就可追踪中枢神经系统中各种神经结构的代谢率。结 果 在感光底片上，代谢率较高的核团和区域银粒较密。用 途 显示处于兴奋状态的神经元链。（六）...
