一、实验目的1、学会使用UV-2550 型紫外 -可见光分光光度计。2、掌握紫外—可见分光光度计的定量分析方法。3、学 会 利 用 紫 外 可 见 光 谱 技 术 进 行 有 机 化 合 物 特 征 和 定 量 分 析的方法。二、实验原理基于物质对200-800nm光谱区辐射的吸收特性建立起来的分析测定方法称为紫外— 可见吸收光谱法或紫外—可见分光光度法。紫外—可见吸收光谱是由分子外层电子能级跃迁产生,同时伴随着分子的振动能级和转动能级的跃迁,因此吸收光谱具有带宽。紫外—可见吸收光谱的定量分析采用朗伯-比尔定律, 被测物质的紫外吸收的峰强与其浓度成正比,即:其中 A 是吸光度, I、I 0 分别为透过样品后光的强度和测试光的强度,ε 为摩尔吸光系数,b 为样品厚度,c 为浓度。紫 外吸收光谱 是由于分 子中 的 电子跃迁产生的。按分子轨道理论,在有机化合物分子中这种吸收光谱取决于分子中成键电子的种类、电子分布情况,根据其性质不同可分为3 种电子:( 1)形成单键的σ 电子;( 2)形成不饱和键的π 电子;( 3)氧、氮、硫、卤素等杂原子上的未成键的n 电子。图 1. 基团中的σ, π,n 成键电子当它们吸收一定能量Δ E 后,将跃迁到较高的能级,占据反键轨道。分子内部结构与这种特定的跃迁是有着密切关系的,使得分子轨道分为成键 σ 轨道、反键σ *轨道、成键π 轨道、反键π * 轨道和 n 轨道,其能量由低到高的顺序为:σ <π