动物细胞融合和单克隆抗体的制备VIP免费

2002年12月30日，两场筹备了10年的“太空婚礼”首次在神舟四号飞船上举行，植物细胞“新人”—黄花烟草和革新一号烟草叶肉细胞原生质体，动物细胞“新人”是小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，两批新人同时在电融合仪内孕育新生命。“太空婚礼”这两场“太空婚礼”实质是哪两项细胞工程技术这两场“太空婚礼”实质是哪两项细胞工程技术植物体细胞杂交技术动物细胞融合技术2.2动物细胞工程2.2.2动物细胞融合和单克隆抗体杂种细胞愈伤组织杂种植株植物细胞A植物细胞B原生质体A原生质体B去壁原生质体融合植物组织培养植物体细胞杂交1、如果让动物细胞进行融合，应注意动、植物之间的哪些区别？•无细胞壁•全能性受限制，不能发育成杂种动物动物细胞融合与植物细胞杂交的不同：•无需去除细胞壁•不能培养成新的动物个体2、请同学们根据植物体细胞杂交技术，设计动物细胞融合的流程。杂种细胞愈伤组织杂种植株植物细胞A植物细胞B原生质体A原生质体B去壁原生质体融合植物组织培养植物体细胞杂交动物细胞融合过程不同DNA的两个细胞灭活的病毒有丝分裂两个完整的杂交细胞1、为什么可以用灭活的病毒？2、病毒不灭活可以吗？不灭活的病毒会感染细胞，而不能诱导细胞融合。病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。一.动物细胞融合1.概念：指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。4.结果：形成含有2或多个细胞遗传物质的单核杂交细胞2.融合原理：细胞膜的流动性3.诱导方式物理法：离心、振动、电激化学法：聚乙二醇（PEG)生物法：灭活的病毒(特有)5.意义：突破有性杂交局限，使远缘杂交成为可能广泛应用多个领域为制造单克隆抗体单克隆抗体开辟了新途径6、植物体细胞杂交和动物细胞融合的区别比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合细胞融合原理是否需去壁诱导方法用途获得杂种植株细胞膜的流动性细胞膜的流动性植物细胞的全能性去除细胞壁后诱导原生质体融合诱导细胞融合物理（离心、振荡、电激）化学（聚乙二醇）物理、化学方法（同左）灭活的病毒主要用于制备单克隆抗体二.单克隆抗体1、抗体是由何种细胞产生的？2、一个浆细胞能产生几种抗体？浆细胞（效应B细胞）动物在免疫反应的过程中，体内产生的特异性抗体种类可多达百万种以上，但是，每一个浆细胞只能分泌一种特异性抗体抗原动物体内刺激浆细胞抗体抗原不纯抗体不纯筛选单一B细胞不能无限增殖产生大量抗体缺陷：产量低、纯度低、特异性差。3、传统抗体制备方法及缺陷二.单克隆抗体活动1：设计方案如何大量获得化学性质单一、特异性强的抗体？（同桌讨论）提示：2.什么样的细胞可以无限增值？二.单克隆抗体1.什么样的细胞可以产生抗体？3.什么方法可以使一个细胞表现两种细胞的特征？一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞－－能够无限增殖杂种细胞二、单克隆抗体1.设计方案：（一）单克隆抗体的制备2、单克隆抗体由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。特点：特异性强，灵敏度高，可大量制备二、单克隆抗体（一）单克隆抗体的制备活动2：请同学们观看视频，完成单克隆抗体制备过程的图解，思考讨论解决以下问题。（8分钟）1.要给小鼠做什么处理？为什么？2.融合后有几种细胞？有几种杂交细胞？3.制备过程中两次筛选的目的分别是什么？4.如何大规模进行培养得到大量的单克隆抗体？产生所需抗体的B淋巴细胞骨髓瘤细胞产生其他抗体的B淋巴细胞除了动物细胞融合的方法制备单克隆抗体，你还有别的方法吗？请与同桌讨论，拿出新的方案。？33、、单克隆抗体的应用单克隆抗体的应用（1）作为诊断试剂——最广泛应用准确、高效、简易、快速（如同位素标记（如同位素标记单克隆抗体，可单克隆抗体，可诊断肿瘤、心血诊断肿瘤、心血管畸形等）管畸形等）“生物导弹”＝单克隆抗体＋药物单抗导向，药物为弹头主要用于癌症治疗，单克隆抗体作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”，准确杀伤癌变细胞。（2）用于治疗疾病和运载药物课堂小结动物细胞融合单克隆抗体...