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分解纤维素的微生物VIP免费

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森林生态系统1、生态系统的成分?2、分解者的作用?3、土壤中分解尿素的细菌的如何分离?4、枯枝落叶的成分?回顾:土壤中能水解纤维素的微生物1、纤维素在生物圈的分布状况?2、纤维素酶的组成及作用?一种复合酶,包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶回顾:纤维素和纤维素酶纤维素纤维二糖葡萄糖C1酶、CX酶葡萄糖苷酶能够溶解纤维素的粘细菌1能够溶解纤维素的粘细菌2选择培养1、配方是液体培养基还是固体培养基?为什么?2、此培养基对微生物是否有选择作用?如果有,是如何选择的?3、你能否设计一个对照实验,说明选择培养基的作用?用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照选择培养基配方:纤维素粉5gNaNO31gNa2HPO4﹒7H2O1.2gKH2PO40.9gMgSO4﹒7H2O0.5gKCl0.5g酵母膏0.5g水解酪素0.5g将上述物质水解后,用蒸馏水定容到1000ml有。碳源是纤维素,所以能分解纤维素的微生物可以大量繁殖。以纤维素作为唯一碳源利用纤维素刚果红培养基筛选菌种的原理是:1、刚果红可以跟大分子多糖牢固结合。2、纤维素是大分子多糖,跟刚果红牢固结合。3、纤维素酶降解平板中的纤维素成小分子糖,刚果红无法与小分子糖结合,就被洗脱下来,呈现透明圈。刚果红染色法方法一:先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应方法二:在倒平板时就加入刚果红思考:这两种方法各有哪些优点与不足方法一缺点是操作烦琐,加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂;优点是这样显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用方法二优点是操作简便,不存在菌落混杂问题缺点一是由于培养基中还含有淀粉类物质,可以使能产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应;缺点二有些微生物具有降解色素的能力,它们在长时间培养过程中会降解刚果红,形成明显的透明圈,与纤维素分解菌不易区分土壤中纤维素分解菌的分离土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上挑选产生透明圈的菌落①①分布环境分布环境((11)土壤取样:)土壤取样:富含纤维素的环境中富含纤维素的环境中操作步骤操作步骤由于生物与环境的相互依存关系,在由于生物与环境的相互依存关系,在富含纤维素的环境中,纤维素分解菌的含富含纤维素的环境中,纤维素分解菌的含量相对提高,因此从这种土样中获得目的量相对提高,因此从这种土样中获得目的微生物的几率要高于普通环境。微生物的几率要高于普通环境。②②原因原因③③实例:树林中多年落叶形成的腐殖土,多年实例:树林中多年落叶形成的腐殖土,多年积累的枯枝败叶等。积累的枯枝败叶等。④④讨论讨论::如果找不到合适的环境,可以将滤纸如果找不到合适的环境,可以将滤纸埋在土壤中,将滤纸埋在土壤中有什么作用?埋在土壤中,将滤纸埋在土壤中有什么作用?你认为滤纸应该埋在土壤中多深?你认为滤纸应该埋在土壤中多深?答:将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相答:将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对集中,实际上是人工设置纤维素分解菌生对集中,实际上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境。一般应将滤纸埋于深约存的适宜环境。一般应将滤纸埋于深约10c10cmm左右的土壤中。左右的土壤中。((22)选择培养)选择培养①①目的:目的:增加纤维素分解菌的浓度,以确保能增加纤维素分解菌的浓度,以确保能够从样品中分离所需要的微生物够从样品中分离所需要的微生物②②操作:称取土样操作:称取土样20g20g,在无菌条件下加入装,在无菌条件下加入装有有30mL30mL培养基的摇瓶中。将摇瓶置于摇床上,培养基的摇瓶中。将摇瓶置于摇床上,在在30℃30℃下振荡培养下振荡培养11~~2d2d,至培养基变混,至培养基变混浊。吸取一定的培养液(约浊。吸取一定的培养液(约5mL5mL),转移至),转移至另一瓶新鲜的选择培养基中,以同样的方法培另一瓶新鲜的选择培养基中,以同样的方法培养到培养液变浑浊。养到培养液变浑浊。((33)梯度稀释:)梯度稀释:((44)涂布培养)涂布培养11、刚果红染色法、刚果红染色法::((55)筛选菌株:)筛选菌株:常用的刚果红染色法有两种,常用的刚果红染色法有两种,一种是先培养微生物,再加入刚果红进一种是先培养微生物,再加入刚果红进行染色反应,行染色反应,另一...

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