刘庆龙 整理编辑 1 / 6 临床交叉配血操作规程 交叉配血试验 (凝聚胺法) [原理] 凝聚胺试验是利用低离子溶液促进红细胞抗原与血清(浆)中的抗体反应,再利用凝聚胺引起红细胞间非免疫性的凝集,让已有抗体(IgG)反应的红细胞间的距离缩短。距离缩短后更能引起已反应的抗体和别的红细胞产生反应形成免疫性的凝集。而由凝聚胺所引起的非免疫性红细胞凝集反应可被后来加入的复悬液所中和而散开,如有免疫反应,凝集就不会散开,为阳性反应。如没有免疫反应,凝集就会散开,为阴性反应。交叉配血试验是在盐水介质的基础上加入凝聚胺,检测供患之间是否相合,患者血清(浆)中是否含有具临床意义的红细胞异体抗体。 [试剂组成] 1.洁净试管,离心机,显微镜。 2.0.85% 氯化钠溶液:准确称取氯化钠(AR )8.5 g,用蒸 馏 水溶解 并 定 容 至 1000 ml。 试剂 启 用后,有效 期 为:二 周 。 3.凝聚胺试剂 ① 低离子介质溶液:含葡 萄 糖 ,乙 二 胺四 醋 酸 -2 钠及 稳 定 剂 。 ② 凝聚胺溶液:含凝聚胺,氯化钠及 稳 定 剂 。 ③ 复悬液:含柠 檬 酸 钠,葡 萄 糖 及 稳 定 剂 。 ④ 阳性对 照 血清:含抗 D 血清,氯化钠及 稳 定 剂 。 4.抗人 IgG 血清。 [试剂保存和稳定性] 1.凝聚胺试剂 须 保 存 在 2-25℃。 2.有效 期 内 可使 用。 3.抗人 IgG 血清低温 冰 箱 保 存 。复溶后放 2— 4℃冰 箱 保 存 。 刘庆龙 整理编辑 2 / 6 [标本收集和准备] 1.抽取受血者静脉血 3-4ml(操作中小心防止红细胞破损),放入一已贴标签干燥洁净的试管中为血清管(也可用 EDTA-K2 抗凝血液),并将注射器中余下的少量血液配成 2%红细胞生理盐水悬液,放入另一已贴标签干燥洁净的试管中为红细胞悬液管。 以上标本有效期为三天;若受血者抽取标本后,输用过血液或血液制品,且输用时间超过 12 小时的,必须重新采集标本。 2. 2% 红细胞悬液:用生理盐水洗涤红细胞 3 次。 根据下表进行红细胞悬液的配制。 悬液浓度(%) 压积红细胞(滴) 盐水(滴) ---------------------------------------------------------------- 2 1 2ml(40) 5 1 0.8ml(16) ---------------------------------------------------------------- [操 作步骤] 1.取出 3 支试管分别标记主,次及对照测试: 主测管:加入病人血清(浆)2 滴,再加入...