临床微生物检测的基因同源性分析 医 院 感 染 的 流 行 病 学 研 究 是 临 床 微 生 物 学 工 作 者 的 重 要 课 题 ,在 医院 感 染 监 测 的 研 究 中 , 一 个 很 重 要 的 问 题 就 是 如 何 确 定 感 染 途 径 和 传 播 途 径 , 以采 取 有 效 预 防 和 控 制 措 施 , 从 而 防 止 医 院 感 染 或 者 暴 发 流 行 , 因 此 对 微 生 物 鉴 定和 菌 株 同 源 性 分 析 提 出 了 更 高 的 要 求 。 目 前 ,传 统 的 细 菌 鉴 定 和 同 源 性 分 析 技 术 已 不 能 很 好 地 满 足 医 院 感染 诊 断 和 流 行 病 学 调 查 的 需 要 , 从 型 、亚型 、株 , 甚至分 子水平上去认识细 菌 变得愈来愈重 要 了 。 近年来分 子生 物 学 的 理论和 技 术 在 细 菌 感 染 诊 断 中 的 渗透和 广泛应用, 使得细 菌 鉴 定 、耐药基因 的 检测 、分 子流 行 病 学 调 查 变得更 加准 确 、简洁 和 快 速 。 细 菌DNA 同 源 性 分 析 技 术 如 脉 冲 场 凝 胶 电 泳 、聚 合 酶 链 反 应、DNA 探 针 杂 交 以 及 序 列 分 析 等 方 法 是 目 前 在 分 子水平上分 析 细 菌 的 主 要 手段 , 它 在 鉴 定 细 菌 感 染 的 爆 发 、确 定 院 内 交 叉 感 染 、感 染 病 原 菌 之 间 的 基因 同 源性 等 方 面 有 着 重 要 的 作 用,本 文 将 对 常 用基因 同 源 性 分 析 方 法 的 机 理和 过 程 做 简要 综 述 。 一 、质 粒 分 型 (Plasmid profile assay): 1、原 理: 质 粒 是 可 移 动 的 染 色 体 外 元 件 , 可 以 自 发 丢 失 或 者 被 宿 主 稳 定 地 获得, 因 此 流 行 病 学 上相 关 的 分 离 菌 株 有 可 能 表 现 出 不 同 的 质 粒 图 谱 。 把 质 粒 提 取出 来,进 行 常 规 的 琼 脂 糖 电 泳 分 析 ,就 可 以 知 道 分 离 菌 株 携 带 质 粒 的 大 小 和 数 目 。 2、实 验 过 程 : a.质 粒 抽 提 ; b.0.8%琼 脂 糖 电 泳 ; c.EB 染 色 、凝 胶 成 像...