四川大学实验报告1 / 7题目：巨噬细胞吞噬作用的观察一． 实验目的1.通过小鼠腹腔巨噬细胞对异物吞噬作用的观察，了解巨噬细胞在非特异性免疫中的功能。2.掌握小鼠等实验动物腹腔巨噬细胞采集和制片的方法。3.学习小鼠腹腔注射的操作方法和步骤。二． 实验原理1. 向小鼠腹腔内注射无菌淀粉肉汤，排异反应使小鼠产生大量巨噬细胞， 且巨噬细胞吞噬淀粉肉汤后不会对细胞造成伤害，反而被“喂养” 。连续多天注射使小鼠腹腔内聚集大量巨噬细胞。2. 台盼蓝是一种生物染料，专一染色死细胞。 活细胞的细胞质膜对台盼蓝有不透过性。巨噬细胞吞噬含有台盼蓝的淀粉肉汤后，可以消化其中的淀粉和蛋白质，但是不能消化其中的台盼蓝，因此台盼蓝会聚集在溶酶体中。是一种溶酶体染色的方法。3. 当向小鼠腹腔中注射鸡红细胞时，鸡红细胞作为外源物质，会被小鼠细胞识别并吞噬，在适当的的时机， 我们就有可以在显微镜下观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程四川大学实验报告2 / 7三． 实验材料及设备1.实验材料：a) 连续 2~3 天向腹腔中注射含台盼蓝的淀粉肉汤的小鼠一只b) 鸡红细胞悬液c) 生理盐水2.实验设备：a) 普通光学显微镜b) 载玻片、盖玻片若干c) 注射器d) 染色皿若干、吸水纸、滴管、剪刀、白瓷板等四川大学实验报告3 / 7四． 实验方法及步骤1. 小鼠处理与巨噬细胞采集a) 连续 2-3 天（每天一次）向小鼠腹腔中注射含台盼蓝的淀粉肉汤。b) 选择已注射淀粉肉汤3 小时以上的小鼠一只。c) 一人控制住小鼠，露出腹部，另一人用注射器向小鼠腹腔中注射 1ml 鸡红细胞悬液。按摩小鼠腹部。d) 20-30 分钟后，再注射1-1.5ml生理盐水（ 0.9%NaCl）按摩小鼠腹部。e) 3 分钟后，引颈法处死小鼠f)迅速在腹腔剪开一个不大的开口（注意要剪开腹部的肌肉层），用无针头的注射器吸取腹腔液。g) 在载玻片上滴2-3 滴腹腔液，加上盖玻片，在显微镜下观察。2. 观察在不同倍数下观察样本，找到正在消化或者吞噬鸡红细胞的巨噬细胞。注意避免玻片液体干涸。五． 实验结果四川大学实验报告4 / 7图 1 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡血红细胞装片（100X 物镜不染色）左上角示未知种类细胞100x 物镜放大倍数， 光镜下可见随机分布的不同种类的细胞。巨噬细胞体积最大， 未吞噬鸡红细胞时呈边缘不规则的球状，可见胞质中存在不均匀分布内含物。部分巨噬细胞中可见一个或多个颜色更深的橄榄形鸡红细胞。小鼠红细胞呈现两面凹的圆饼状，并且...
