巨噬细胞吞噬作用的观察试验报告VIP专享VIP免费

1 / 7巨噬细胞吞噬作用的观察实验报告一. 实验目的1.通过小鼠腹腔巨噬细胞对异物吞噬作用的观察，了解巨噬细胞在非特异性免疫中的功能。2.掌握小鼠等实验动物腹腔巨噬细胞采集和制片的方法。3.学习小鼠腹腔注射的操作方法和步骤。二. 实验原理1. 向小鼠腹腔内注射无菌淀粉肉汤，排异反应使小鼠产生大量巨噬细胞，且巨噬细胞吞噬淀粉肉汤后不会对细胞造成伤害，反而被“喂养”。连续多天注射使小鼠腹腔内聚集大量巨噬细胞。2. 台盼蓝是一种生物染料，专一染色死细胞。活细胞的细胞质膜对台盼蓝有不透过性。巨噬细胞吞噬含有台盼蓝的淀粉肉汤后，可以消化其中的淀粉和蛋白质，但是不能消化其中的台盼蓝，因此台盼蓝会聚集在溶酶体中。是一种溶酶体染色的方法。3. 当向小鼠腹腔中注射鸡红细胞时，鸡红细胞作为外源物质，会被小鼠细胞识别并吞噬，在适当的的时机，我们就有可以在显微镜下观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程2 / 7三. 实验材料及设备1.实验材料：a）连续 2~3 天向腹腔中注射含台盼蓝的淀粉肉汤的小鼠一只b）鸡红细胞悬液c）生理盐水2.实验设备：a）普通光学显微镜b）载玻片、盖玻片若干c）注射器d）染色皿若干、吸水纸、滴管、剪刀、白瓷板等3 / 7四. 实验方法及步骤1. 小鼠处理与巨噬细胞采集a）连续 2-3 天（每天一次）向小鼠腹腔中注射含台盼蓝的淀粉肉汤。b）选择已注射淀粉肉汤3 小时以上的小鼠一只。c）一人控制住小鼠，露出腹部，另一人用注射器向小鼠腹腔中注射 1ml 鸡红细胞悬液。按摩小鼠腹部。d）20-30 分钟后，再注射1-1. 5ml 生理盐水 （0. 9%NaCl）按摩小鼠腹部。e）3 分钟后，引颈法处死小鼠f）迅速在腹腔剪开一个不大的开口（注意要剪开腹部的肌肉层），用无针头的注射器吸取腹腔液。g）在载玻片上滴2-3 滴腹腔液，加上盖玻片，在显微镜下观察。2. 观察在不同倍数下观察样本，找到正在消化或者吞噬鸡红细胞的巨噬细胞。注意避免玻片液体干涸。五. 实验结果4 / 7图 2 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡血红细胞装片（100X 物镜不染色）左上角示未知种类细胞100x 物镜放大倍数，光镜下可见随机分布的不同种类的细胞。巨噬细胞体积最大，未吞噬鸡红细胞时呈边缘不规则的球状，可见胞质中存在不均匀分布内含物。部分巨噬细胞中可见一个或多个颜色更深的橄榄形鸡红细胞。小鼠红细胞呈现两面凹的圆饼状，并且存在一种外表呈不规则突出的细胞，大小和红细胞相似。巨噬细胞较为固定，可见小鼠红细胞在...