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2025年植株生理生长指标的测定VIP免费

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根系活力的测定(TTC 法)植株根系是活跃的吸取器官和合成器官,根的生长状况和活力水平直接影响地上部分的生长、营养状况及产量水平。一、原理氯化三苯基四氮唑(TTC)是原则氧化电位为 80mV 的氧化还原色素,溶于水中成为无色溶液,但还原后即生成红色而不溶于水的三苯甲腙,生成的三苯甲腙比较稳定,不会被空气中的氧自动氧化,因此 TTC 被广泛地用作酶实验的氢受体,植物根系中脱氢酶所引发的 TTC 还原,可因加入琥珀酸,延胡索酸,苹果酸得到增强,而被丙二酸、碘乙酸所克制。因此 TTC 还原量能表达脱氢酶活性并作为根系活力的指标。二、材料、设备仪器及试剂(一)材料水培或砂培小麦、玉米等植物根系。 (二)仪器设备1. 分光光度计;2. 分析天平(感量 0.1mg);3. 电子顶载天平(感量 0.1g);4. 温箱;5. 研钵;6. 三角瓶 50ml;7. 漏斗;8. 量筒 100ml;9. 吸量管 10ml;10. 刻度试管 10ml;11. 试管架;12. 容量瓶 10ml;13. 药勺;14. 石英砂适量;15. 烧杯 10ml、1000ml。 (三)试剂1、乙酸乙酯(分析纯)。2、次硫酸钠(Na2S2O4),分析纯,粉末。3、1%TTC 溶液:精确称取 TTC 1.0g,溶于少量水中。定容到 100ml。4、0.4%TTC 溶液:精确称取 TTC 0.4g,溶于少量水中。定容到 100ml。5、磷酸缓冲液(1/15mol/L,pH7):6、1mol/L 硫酸:用量筒取比重 1.84 的浓硫酸 55ml,边搅拌边加入盛有 500ml 蒸馏水的烧杯中,冷却后稀释至 1000ml。7、0.4mol/L 琥珀酸:称取琥珀酸 4.72g,溶于水中,定容至 100ml 即成。三、实验环节1、定性测定(1)配制反映液:把 1%TTC 溶液、0.4 mol/L 的琥珀酸和磷酸缓冲液按 1:5:4 比例混合。(2)把根认真洗净,把地上部分从茎基切除。将根放入三角瓶中,倒入反映液,以浸没根为度,置37℃左右暗处放 1~3h,以观察着色状况,新根尖端几毫米以及细侧根都明显地变成红色,表明该处有脱氢酶存在。2、定量测定(1)TTC 原则曲线的制作取 0.4%TTC 溶液 0.2ml 放入 10ml 量瓶中,加少量 Na2S2O4粉摇匀后立刻产生红色的甲腙。再用乙酸乙酯定容至刻度,摇匀。然后分别取此液 0.25ml、0.50ml、1.00ml、1.50ml、2.00ml 置 10ml 容量瓶中,用乙酸乙酯定容至刻度,即得到含甲腙 25μg、50μg、100μg、150μg、200μg 的原则比色系列,以空白作参比,在 485nm 波长下测定吸光度,绘制原则曲线。(2)称取根尖样品 0.5g,放入 10m...

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