2025年植株生理生长指标的测定VIP免费

根系活力的测定（TTC 法）植株根系是活跃的吸取器官和合成器官，根的生长状况和活力水平直接影响地上部分的生长、营养状况及产量水平。一、原理氯化三苯基四氮唑（TTC）是原则氧化电位为 80mV 的氧化还原色素，溶于水中成为无色溶液，但还原后即生成红色而不溶于水的三苯甲腙，生成的三苯甲腙比较稳定，不会被空气中的氧自动氧化，因此 TTC 被广泛地用作酶实验的氢受体，植物根系中脱氢酶所引发的 TTC 还原，可因加入琥珀酸，延胡索酸，苹果酸得到增强，而被丙二酸、碘乙酸所克制。因此 TTC 还原量能表达脱氢酶活性并作为根系活力的指标。二、材料、设备仪器及试剂（一）材料水培或砂培小麦、玉米等植物根系。 （二）仪器设备1. 分光光度计；2. 分析天平（感量 0.1mg）；3. 电子顶载天平（感量 0.1g）；4. 温箱；5. 研钵；6. 三角瓶 50ml；7. 漏斗；8. 量筒 100ml；9. 吸量管 10ml；10. 刻度试管 10ml；11. 试管架；12. 容量瓶 10ml；13. 药勺；14. 石英砂适量；15. 烧杯 10ml、1000ml。 （三）试剂1、乙酸乙酯（分析纯）。2、次硫酸钠（Na2S2O4），分析纯，粉末。3、1％TTC 溶液：精确称取 TTC 1.0g，溶于少量水中。定容到 100ml。4、0.4％TTC 溶液：精确称取 TTC 0.4g，溶于少量水中。定容到 100ml。5、磷酸缓冲液（1/15mol/L，pH7）：6、1mol/L 硫酸：用量筒取比重 1.84 的浓硫酸 55ml，边搅拌边加入盛有 500ml 蒸馏水的烧杯中，冷却后稀释至 1000ml。7、0.4mol/L 琥珀酸：称取琥珀酸 4.72g，溶于水中，定容至 100ml 即成。三、实验环节1、定性测定（1）配制反映液：把 1%TTC 溶液、0.4 mol/L 的琥珀酸和磷酸缓冲液按 1:5:4 比例混合。（2）把根认真洗净，把地上部分从茎基切除。将根放入三角瓶中，倒入反映液，以浸没根为度，置37℃左右暗处放 1~3h，以观察着色状况，新根尖端几毫米以及细侧根都明显地变成红色，表明该处有脱氢酶存在。2、定量测定（1）TTC 原则曲线的制作取 0.4％TTC 溶液 0.2ml 放入 10ml 量瓶中，加少量 Na2S2O4粉摇匀后立刻产生红色的甲腙。再用乙酸乙酯定容至刻度，摇匀。然后分别取此液 0.25ml、0.50ml、1.00ml、1.50ml、2.00ml 置 10ml 容量瓶中，用乙酸乙酯定容至刻度，即得到含甲腙 25μg、50μg、100μg、150μg、200μg 的原则比色系列，以空白作参比，在 485nm 波长下测定吸光度，绘制原则曲线。（2）称取根尖样品 0.5g，放入 10m...