1 目 录 2 实验一 培养基母液的制备„„„„„„„„„„„„„„„„„„„1 实验二 培养基的配制与灭菌„„„„„„„„„„„„„„„„„„6 实验三 无菌操作及种子无菌播种„„„„„„„„„„„„„„„„9 实验四 激素对器官分化及愈伤组织诱导的影响„„„„„„„„„„13 实验五 茎尖培养与脱毒„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„16 实验六 有丝分裂制片技术和显微观察„„„„„„„„„„„„„„18 实验七 植物多倍体细胞的诱发与鉴定„„„„„„„„„„„„„„22 实验八 植物组织总 DNA的提取与测定„„„„„„„„„„„„„„24 实验九 毛状根培养„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„27 附 录„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„32 3 实验一 培养基母液的制备 一、实验目的 学习和掌握培养基母液的配制方法和注意事项
二、实验原理 培养基的主要成分包括无机营养物质、碳源、有机物质、植物生长物质等,由于每种培养基往往含有一二十种化合物,配制起来不仅繁琐,而且还很难达到准确和精确,尤其是生长调节物质和微量元素用量较少,难于准确称量,稍有偏差,就会影响试验结果及试验的重复性
为解决这一问题,常常将大量元素、微量元素、铁盐、有机物质、激素类分别配制成比培养基配方需要量大若干倍的母液
当配制培养基时,只需要按预先计算好的量吸取母液即可
三、实验药品和试剂 NH4NO3、KNO3、MgSO4·7H2O、(NH4)2SO4、NaH2PO4·H2O、CaCl2·2H2O、MgSO4·7H2O、KH2PO4、Na2-EDTA·2H2O、FeSO4·7H2O、MnSO4·4H2O、ZnSO4·7H2O、H3BO3、KI、Na2MoO4·2H2O、CuSO4·5H2O、CoCl2·6H2O、肌醇、烟酸、盐酸吡哆醇(VB6)、盐酸硫胺素(VB1