生物制品生产用动物细胞制备及检定规程Requirements for Preparation and Control of Animal Cell Substrates Used for Production of Biologics本规程合用于生产和/或检定疫苗等生物制品的细胞培养，其中涉及二倍体细胞、传代细胞和原始细胞培养。本规程对这些细胞的性质、质量及安全性检定提出了明确规定。A 对各类细胞培养总的规定1 细胞库的建立来自人或动物的细胞，已经通过全方面检定，并得到国家药品管理当局同意，方可用于生物制品生产及检定。1.1 原始细胞库 由一种原始细胞群体，发展成细胞系（株）或通过克隆培养而形成拘泥的细胞群体，通过检定证明合用于生物制品生产及检定。为了确保能持续使用而建立原始细胞库。目的是使得制品每一生产周期，都能提供一种已标定好的相似质量的细胞源。因此，在特定条件下由有一定数量、成分一致的细胞，按一定量均匀分装于安瓿，于液氮或-100℃下列冻存备用，即为原始细胞库。1.2 主细胞库（MCB）取原始细胞种子，通过对应方式进行细胞传代，增殖一定数量细胞，将全部细胞均匀混合成一批，定量分装安瓿，保存于液氮或-100℃下列备用。这些细胞必须以其本身的特定质控规定进行全方面检定，全部合格后即为主细胞库，为建立工作细胞库用。1.3 工作细胞库（WCB）工作细胞库的细胞由主细胞库细胞传代扩增而来。主细胞库之细胞经传代增殖，达成一定代次水平的细胞，全部合并成一批均质细胞群体，再按规定的细胞数量分装安瓿，保存于液氮或-100℃下列备用。冻存时细胞的传代水平须确保细胞复后传代增殖的细胞数量能满足生产一批或一种亚批产品。此时传代的水平必须在该细胞用于生产限制最高代次之。工作细胞库细胞，必须按该细胞的检定规定，逐项进行全方面检定，合格后方可用于生产。1.4 生产用细胞培养取出冻存的工作细胞库中一种或多个安瓿，混合后培养，传递一定代次后供生产制品使用。其代次不得超出对该细胞用于生产的最高限制代次。从工作细胞库取出的细胞种子增殖出来的细胞，不再回冻保存和再用于生产。1.5 体外培养细胞龄的计算二倍体细胞龄以细胞群体倍增计算，以每个培养容器细胞群体细胞数为基础，每增加一倍作为一世代，即 1 瓶细胞传 2 瓶（1：2 分种率）再长满瓶为一世代；1 瓶传 4 瓶（1：4）为二世代；1 瓶传 8 瓶（1：8）则为三世代。生产用细胞龄限制在细胞寿命期限的前2/3。传代细胞系则以一定稀释倍数进行传代，每传一次为一代。根据每个细胞系的时...
