研 究 用 Code No. RR047A 说 明 书 PrimeScriptTM RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) v201405Da 目 录 内 容 页 码 ● 制 品 说 明 1 ● 制 品 内容 1 ● 试 剂 盒 外 必 备 材 料 1 ● 保 存 1 ● 特 长 2 ● 使 用 注 意 2 ● 操 作 方 法 2 ● Real Time PCR 4 ● 实 验 例 6 ● 附 录 7 ● 关 联 产 品 8 ● 制 品 说 明 为 了 准 确 地 进 行 基 因 表 达 量 分 析 ， 必 须 满 足 只 有 cDNA 作 为 模 板 检 出 的 先 决 条 件 ， 但 Total RNA 中 常 常混 有 基 因 组 DNA， 并 可 以 直 接 作 为 PCR 反 应 的 模 板 进 行 扩 增 ， 因 此 会 造 成 解 析 结 果 不 准 确 。 为 了 避 免 这种 情 况 发 生 ， 通 常 将 检 测 用 引 物 设 计 在 内 含 子 前 后 的 外 显 子 上 ， 使 基 因 组DNA 得 不 到 扩 增 。 但 是 ， 此 方法 不 适 合 具 有 单 个 外 显 子 的 基 因 或 两 个 外 显 子 之 间 所 跨 的 内 含 子 过 小 的 基 因 ，同 时 当 基 因 组 上 有 伪 基 因 存在 时 、 或 设 计 引 物 对 基 因 组 有 非 特 异 性 扩 增 时 、 以 及 基 因 信 息 没 被 完 全 解 析 的 生 物 种 等 也 同 样 不 适 合 于 本方 法 。 在 这 种 情 况 下 ， 我 们常 常 需要对 Total RNA 样 品 进 行 DNase I 处理， 以 除去残存 的 基 因 组 DNA。而 DNase I 处理通 常 要进 行 复杂的 纯化操作 ， 同 时 会 造 成 RNA 的 降解 和损失。 PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser 是 可 以 除去基 因 组 DNA 进 行 Real Time RT-PCR 反 应 的 专用 反 转录试剂。 Kit 中 使 用 了 具 有 较强 DNA 分 解 活性 的 gDNA Eraser， 通 过 42℃， 2 min 即可 除去基 因组 DNA。 同 时 由于 反 转录试剂中 含 有 抑制 DNA 分 解 酶活性 的 组 分 ， 经过 gDNA Eraser 处理后 的 样 品 可以 直 接 进 行 15 min 的 反 转录反 应 合 成 cDNA， 因 此 ...
