试剂配制 (1)液体LB 培养基(-) 1000m l 蛋白胨 10g 酵母提取物 5g 氯化钠 10g 去离子水溶解并定容至 1000m l 高压灭菌,4℃保存
(2)氨苄青霉素溶液(100m g/m l) 10m l 氨苄青霉素 1g 去离子水溶解并定容至 10m l 过滤除菌,-20℃分装保存
(3)卡那霉素溶液(100m g/m l) 10m l 卡那霉素 1g 去离子水溶解并定容至 10m l 过滤除菌,-20℃分装保存
(4)固体LB 培养基(-) 1000m l 蛋白胨 10g 酵母提取物 5g 氯化钠 10g 琼脂糖粉 15g 去离子水溶解并定容至 1000m l 高压灭菌后铺平板(6cm 培养皿),冷却后 4℃保存
(5)含抗生素 LB 固体培养基 1000m l 固体LB 培养基溶液 1000m l 高压灭菌, 当培养基降温至50℃左右,加入终浓度为 100μg/ml 的氨苄青霉素或 100μg/ml 卡那霉素,并铺平板(6cm 培养皿),冷却后, 4℃保存
1M CaCl2 溶液— 制备感受态 1000m l 氯化钙 11
099g 去离子水溶解,定容至 1000m l 高压灭菌后 4℃保存
1M MgCl2 溶液---制备感受态 1000m l 氯化镁 9
521g 去离子水溶解,定容至 1000m l 高压灭菌后 4℃保存
1M CaCl2-15%甘油溶液----制备感受态 1000ml 氯化钙 9
521g 50%甘油 300ml 去离子水溶解,定容至 1000ml 高压灭菌后4℃保存
(9)50%甘油溶液 100ml 甘油 50ml 去离子水 50ml (10)0
5M EDTA 溶液(PH=8
0) 500ml EDTA 93
05g 去离子水溶解,NaOH 调 PH 至8
0,定容至500ml