J I A N G S U U N I V E R S I T Y 实 验 报 告 系别:药 学 院 班级:制药0 9 0 1 姓名:张 丽 琴 学号:3 0 9 0 9 0 2 0 0 7 实验二 紫外-可见分光光度计的使用 一、 试验目的 1、 了解紫外-可见分光光度计的基本结构与特点,掌握仪器的使用方法
2、 熟悉测绘吸收曲线的一般方法 3、 掌握紫外-可见分光光度法定量的方法 4、 熟悉平行原则的应用 二、 试验原理 电子跃迁原理 三、 实验步骤 (一)仪器的使用方法 1、接通电源,打开样品室盖,预热 20min 2、比色皿的使用:比色皿不用时浸泡于醇溶液中;使用时手拿比色皿的毛玻璃面,将比色皿用蒸馏水冲洗几遍,然后用待测溶液冲洗两次,然后将待测溶液加入比色皿中,加入溶液体积约为比色皿的2/3或 3/4;将比色皿外壁用卷纸擦干,并且保持透光面洁净,不能有影响光透过的纸屑或痕迹
将比色皿放入光路中,注意比色皿在光路中的方向最好始终保持一致; 3、选择波长,比色皿中置空白溶液,打开样品室盖调节使 T读数为零,关上样品室盖调节使 T 为 100%,反复调节几次,直至读数稳定
(注:改变波长时均需重新调 0和 100%) 4、比色皿配对
将其他比色皿盛放相同的空白溶液,测定其他比色皿与刚才调 0,调 100%的比色皿的吸光度差值,并且记录
选择吸收值小的比色皿作为对照皿;记录其他比色皿与对照比色皿的差值
测定时顺序勿颠倒
5、测定物质吸光度
测定时溶液浓度从稀到浓测定
每次荡洗比色皿 1~2次
注意勿将溶液洒于样品室,否则须立即擦干
6、记录吸光度值
7、测定完毕洗净比色皿,置于醇溶液中,关闭电源
(二)标准曲线的制作样品溶液的测定: 1
配置浓度为 0
5000mg/ml的标准苯甲酸钠储备液 100ml
标准溶液的配置 分别吸取标准苯甲酸钠储备液 1