细胞培养(操作)VIP专享VIP免费

常用设备 准备室的设备： 单蒸馏水蒸馏器、双蒸馏水蒸馏器、酸缸、烤箱、高压锅、储品柜（放置未消毒物品）、储品规（放置消毒过的物品）、包装台。 配液室的设备： 扭力天平和电子天平（称量药品）、PH 计（测量培养用液 PH 值）、磁力搅拌器（配置溶液室搅拌溶液）。 培养室的设备： 液氮罐、储品柜（存放杂物）、日光灯和紫外灯、空气净化器系统、低温冰箱（-80℃）、空调、二氧化碳缸瓶、边台（书写实验记录）。必须放在无菌间的设备：离心机（收集细胞）、超净工作台、倒置显微镜、CO2孵箱（孵育培养物）、水浴锅、三氧消毒杀菌机、4℃冰箱（放置 serum和培养用液）。 无菌操作 无菌室的灭菌： 1.定期打扫无菌室：每周打扫一次，先用自来水拖地、擦桌子、超净工作台等，然后用 3 ‰来苏尔或者新洁尔灭或者 0 .5 ％过氧乙酸擦拭。 2.CO2 孵箱（培养箱）灭菌：先用 3‰新洁尔灭擦拭，然后用 75％酒精擦拭或者0.5％过氧乙酸，再用紫外灯照射 3.实验前灭菌：打开紫外灯、三氧杀菌机、空气净化器系统各 20-30 分钟 4.实验后灭菌：用 75％酒精（3‰新洁尔灭）擦拭超净台、边台、倒置显微镜的载物台。 实验人员的无菌准备： 1.肥皂洗手。 2.穿好隔离衣、带好隔离帽、口罩、放好拖鞋 3.用 75％酒精棉球擦净双手。 无菌操作的演示： 1.凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用 75％酒精擦拭瓶子的外表面 2 .靠近酒精灯火焰操作。 3 .器皿使用前必须过火灭菌 4 .继续使用的器皿（如瓶盖、滴管）要放在高处，使用时仍要过火。 5 .各种操作要靠近酒精灯，动作要轻、准确，不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。 6 .吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管，防止交叉污染。 器械的清洗和消毒 玻璃器械洗消： 一、新的玻璃器皿的洗消： 1.自来水刷洗，除去灰尘。 2.烘干、泡盐酸：烤箱中烘干，然后再浸入 5％稀盐酸中 1 2 小时以除去脏物、铅、砷等物。 3.刷洗、烘干：1 2 小时后立即用自来水冲洗，再用洗涤剂刷洗，自来水冲干净后用烤箱烘干。 4.泡酸、清洗：用清洁液（重铬酸钾 120g：浓硫酸 200m l：蒸馏水 1000m l）浸泡 1 2 小时，然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗 1 5 次，最后蒸馏水冲洗 3 -5 次和用双蒸水过3 次。 5.烘干、包装：洗干净后先烘干，然后用牛皮纸（油光纸）包装。 6.高压消毒：包装好的器皿装入高压锅内盖好盖子，打开开关和安全阀，...