山 东 天 力 药 业 有 限 公 司 标题：细菌内毒素检测操作程序 编号：SOP-QM-243-B 页码：1/9 制定人： 审核人： 批准人： 颁发部门： 日期： 日期： 日期： 生效日期： 分发部门：品质部、中心化验室、过程分析室 目的：规范细菌内毒素检验操作程序。 范围：适用于细菌内毒素检查操作。 责任：品质部组织制定，中心化验室负责实施。 内容 1准备工作 1.1实验设备及用具 1.1.1刻度吸管、称量瓶、镊子、安瓿瓶（2ml、5ml）、药匙、250℃烘烤 1小时。 1.1.2干燥箱、恒温水浴锅、漩涡混合器、精密天平。 1.1.3剪刀、砂轮片、医用胶布、洗耳球、试管架、脱脂棉球、水银温度计、试管 1.2内毒素标准品与实验试剂 1.2.1鲎试剂：在使用前应进行灵敏度测定，原则上购进一个批号测定一次。 1.2.2细菌内毒素检查用水（内毒素含量＜0.015Eu/mL灭菌注射用水）。 1.2.3细菌内毒素国家标准品和工作标准品。 1.2.4 75%乙醇、铬酸洗液。 1.3实验用具的消毒处理：凡是参与实验样品或试剂接触的器具，在实验前必须经除细菌内毒素处理，将洗净的器具经纯化水冲洗后，在250℃干热灭菌至少60分钟。 1.4恒温水浴箱内水浴温度调节到37±1℃。 2鲎试剂灵敏度复核 2.1根据鲎试剂灵敏度的标示值（如：λ =0.25 EU/ml），细菌内毒素工作标准品加入 1ml细菌内毒素检查用水溶解，在漩涡混合器上混匀 15分钟。 2.2将工作标准品制备成 2λ 、λ 、0.5λ 、0.25λ 四个浓度（0.5 EU/ml、0.25 EU/ml、0.125 EU/ml、0.06 EU/ml）的内毒素标准溶液，备用。 例：工作标准品为160 EU/ml时 注意：每稀释一步均应在混合器上混匀30秒。 2.3取18支0.25 EU/ml鲎试剂，每支中加入0.1mlBET 水，然后分别加入0.1ml2.2中制备好的4个浓度的标准液,按浓度从高到低依次加入，每个浓度加4支，；最后2支加入0.1mlBET 水作阴性对照。 2.4将上述试管用医用胶布封口，垂直放入37℃±1℃水浴锅中，保温60±2分钟。放入水浴前把水搅动几下，以使水温均匀。再次检查温度是否在所要求的范围，注意保温和取放过程应避免受到振动造成的假阴性结果。 2.5保温结束后将试管轻轻取出，缓缓转到180°，若关内形成凝胶，不变形、不从管壁滑落者为阳性；未形成凝胶或形成凝胶变形从壁滑落者为阴性。（注意：保温盒拿取试管过程应避免受到震动而造成的假阴性结果） 2.6 结果判定 当最大浓度2λ 4支管均为阳性，最低浓度0.25λ 4支管均为阴性，阴性对...
