1 蛋白表达研究系列之——Western Blot 试验操作指南 目 录 目录 .................................................................................................................................................. 1 一、总蛋白的提取........................................................................................................................... 2 1 试验类型和蛋白类型 ............................................................................................................... 2 2 样品组织类型 ........................................................................................................................... 3 3 蛋白表达峰度判断 ................................................................................................................... 4 4 总蛋白提取的基本步骤 ........................................................................................................... 4 4.1 细胞样品总蛋白的提取操作步骤 ...................................................................................... 5 4.2 组织样品总蛋白的提取操作步骤 ...................................................................................... 5 二、总蛋白BCA 定量 .................................................................................................................... 6 三、SDS-PAGE 凝胶电泳 ............................................................................................................... 7 四、转膜 .......................................................................................................................................... 8 五、信号增强剂处理膜 ................................................................................................................... 9 六、封闭、一抗孵育、二抗孵育 ................................................................................................... 9 1 封闭 .......................................................................................................