1 水中细菌总数的检测1. 实验目的1、学习并掌握水的细菌学检测方法2、了解水质状况与细菌数量在饮用水检测中的重要性。2. 菌落总数 standard plate-count bacteria 水样在营养琼脂上、有氧条件下37°C 培养 48 h 后，所得 1 mL 水样所含菌落的总数。细菌总数是评价水质污染程度的主要卫生指标，所测定的细菌总数增多说明水被生活废弃物污染。由于结果不能说明污染的来源，因此必须结合总大肠菌群数来判断污染源和安全程度。3. 培养基与试剂2.1 营养琼脂成分蛋白胨10 g 牛肉膏3 g 氯化钠5 g 琼脂10~20 g 蒸馏水1000 mL 2.2 制法：根据实际需要量， 按照上述配方称取各成分混合后，加热溶解，调整 pH 为 7.4~7.6，分装于玻璃容器中（如用含有较多杂质的琼脂，应先过滤。），经 103.43 kPa（121° C,15 lb）湿热灭菌 20 min，储存于冷暗处备用。4. 仪器和材料4.1仪器：高压蒸汽灭菌器、干热灭菌箱、水热恒温培养箱、电炉、天平、冰箱。4.2材料：灭菌平皿（直径9 cm）、灭菌试管、刻度吸管、三角烧瓶、采样瓶、酒精灯、消毒水、镊子、试管架等。4.3放大镜或菌落计数器、 pH 计或精密 pH 试纸、火柴或打火机。5. 样品采集5.1自来水的取样： 先将自来水龙头用酒精棉擦拭，再用酒精灯火焰灭菌，打开龙头放水3-5 min，用无菌空三角瓶接取水样200 ml。5.2纯净水取样： 用消毒酒精棉擦拭纯水机出口后，先放走部分水，再用无菌空三角瓶接取水样 200 毫升。5.3地表水的取样 ：应取距水面 10— 15 cm 的深层水样，先将灭菌的带玻璃塞瓶，瓶口向下浸入水中，然后翻转过来，除去玻璃塞，水即流入瓶中，盛满后，将瓶塞盖好，再从水中取出，最好立即检查，否则需放入冰箱中保存。6. 检验步骤6.1生活饮用水（自来水、 纯净水）：以无菌操作方法用灭菌吸管吸取1 mL 充分混匀的水样，注入灭菌培养皿中，倾注约15 ml 已融化并冷却到 45°C 左右的营养琼脂培养基，并立即旋摇平皿，使水样与培养基充分混匀。每次检验时应做一平行接种，同时另用一个平皿只倾注培养基作为空白对照。2 待冷却凝固后，翻转平皿，使底面向上，置于36°C±1°C 条件下连续培养48 h，进行菌落计数，即为1 ml 水样中的菌落总数。6.2水源水：以无菌操作方法吸取1 ml 充分混匀的水样， 注入盛有 9 ml 灭菌生理盐水的试管中，混匀呈 1: 10 稀释液。吸取 1:10 稀释液 1 ml，注入盛有 9 ml 灭菌生理盐水的试管中...
