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LOGO毕业论文开题报告毕业论文开题报告医学院预防医学0701班高君指导老师：李文芳开题报告：论文研究的目的与意义12345国内外研究现状论文拟研究解决的问题论文研究主要内容技术路线、研究方法香烟烟雾影响肺细胞分泌IL-1、IL-6、IL-8水平的体内外研究香烟烟雾影响肺细胞分泌IL-1、IL-6、IL-8水平的体内外研究论文研究的目的与意义研究香烟烟雾提取物（CSE）对人肺泡上皮细胞炎性介质IL-1，IL-6，Il-8表达的影响,探讨肺泡上皮细胞在吸烟所致炎症性肺疾病中的意义.采用自制的动式吸烟装置，制备大鼠长期吸烟模型。检测吸烟后大鼠支气管肺灌洗液中IL-1，IL-6，IL-8的含量，探讨其两者在吸烟导致的肺部损伤动物模型中的作用。吸烟有害健康!吸烟有害健康!国内外研究现状关于吸烟导致肺气肿、慢性阻塞性肺疾病的发病机制的学说中，国内外普遍公认的机制包括：慢性气道和肺部炎症形成、蛋白酶/抗蛋白酶失衡、以及氧化剂/抗氧化剂失衡。从总体上来说吸烟是慢性阻塞性肺部疾病的主要危险因素，目前的研究认为慢性气道炎症是其重要的发病机制，IL-1、IL-6、IL-8为重要的炎症趋化因子，与炎性疾病密切相关。论文拟研究解决的问题one通过整体动物实验，建立大鼠吸烟模型，研究香烟烟雾影响肺细胞分泌IL-1、IL-6、IL-8水平变化，探讨其呼吸道损伤的相关机制.two通过离体细胞实验，制备CSE，用不同浓度的CSE刺激体外培养肺泡Ⅱ型上皮细胞A549，用MTT实验检测细胞存活率，放射免疫法检测细胞培养上清液中IL-1，IL-6，Il-8的表达水平。建立动物吸烟模型通过不同剂量组给烟，测定肺内炎性细胞和白介素分泌的水平，通过数据处理，比较不同吸烟剂量组和不吸烟组之间差异，探讨吸烟与动物呼吸系统炎性损伤的关系制作香烟烟雾提取液。培养人体肺泡Ⅱ性细胞，用不同浓度的香烟烟雾提取液对细胞进行染毒，测定上清液中的白介素的表达水平，比较不同剂量组和空白组之间差异，探讨离体状态下香烟烟雾对肺上皮细胞白介素分泌的影响。对以上实验的结果进行综合的讨论并得出结论。论文研究主要内容论文研究主要内容研究的技术路线、研究方法建立动物吸烟模型研究吸烟与动物呼吸系统炎性损伤的关系研究离体状态下CSE对A549白介素分泌的影响研究吸烟与动物呼吸系统炎性损伤的关系1234采用自主开发的吸烟机给烟，空气与烟气流入比2：1，采用脉冲给烟（4s：4s）,控制每只香烟燃烧速度为3分钟。空白组放入吸烟箱中空吸。每天定点吸烟1次，每周吸烟6d，连续12周.香烟，由武汉卷烟厂提供的黄鹤楼淡雅香烟.对照组（0支/天）；低剂量组（4支/天）；中剂量组（8支/天）；高剂量组（16支/天)清洁级雄性SD大鼠56只，体重90-110g。由华中科技大学同济医学院提供，许可证号SCXK2004-0007研究对象实验动物实验动物分组吸烟方法与试验周期研究吸烟与动物呼吸系统炎性损伤的关系测定指标及其方法观察大鼠一般情况，定期测量纪录体重放射免疫法检测BALF中IL-1、6、81234制玻片，显微镜下进行BALF中白细胞及分类计数麻醉，心尖取血处死，肉眼观察肺大体形态学观察研究离体状态下CSE对A549白介素分泌的影响研究对象：香烟，武汉某卷烟厂提供细胞株：肺泡上皮细胞A549，购自武汉大学细胞典藏中心剂量分组：对照组；10%CSE组；20%CSE组；50%CSE组；100%CSE组试验方法：制备CSE，用不同浓度的CSE刺激体外培养肺泡Ⅱ型上皮细胞A549，用MTT实验检测细胞存活率，放射免疫法检测细胞培养上清液中IL-1，IL-6，Il-8的表达水平。测定指标及其方法：MTT细胞活性测定；白介素表达水平的测定采用的是白介素放射免疫分析试剂盒.相关参考文献1肖卫、蕾茹的《香烟烟雾提取物致人气道平滑肌细胞损伤及对白介素-8表达的影响》2贺丽雅、杨爱民的《IL-8、IL-1、TNF-ɑ水平在吸烟患者COPD发病中意义的探讨》4罗百灵、王丽静的《COPD中组蛋白乙酰化致IL-8表达增高的机制及MAPK途径的调控》3陈忠城、林美玲的《老年慢性阻塞性肺疾病患者血清IL-6、IL-8、TNF-ɑ水平的检测》5许丽、张珍祥的《香烟烟雾提取物对气道上皮细胞损伤作用机制的研究》LOGO