下载后可任意编辑蛋白质含量测定方法【中药材中蛋白质含量测定方法的讨论】蛋白质含量测定方法【中药材中蛋白质含量测定方法的讨论】 近年来,随着基因工程学、分子生物学和现代分离技术的快速进展,蛋白质也成了一项质量和资源评价的指标,故探究测定蛋白质含量的方法有着重要的意义[1]
目前测定蛋白质含量的常用方法有凯氏定氮法、考马斯亮蓝法、紫外分光光度法、双缩脲法、Folin 酚试剂法和双辛可宁酸法[2]等
这些方法也分别应用于测定不同中药材中蛋白质含量
1 考马斯亮蓝法 考马斯亮蓝法是 Bradford 于 1975 年建立的一种色素结合法
其主要原理是考马斯亮蓝 G250 在酸性溶液中与蛋白质通过范德瓦尔引力结合形成最大吸收峰为 595 nm 的复合物,其吸光度与蛋白质含量在 200～1400 μg/ml 之间呈线性关系,故可用于蛋白质含量的测定[3]
赵英永[1]等探讨了考马斯亮蓝 G250 染色法测定草乌药材中可溶性蛋白质含量的方法,并建立了快速、灵敏的测定蛋白质的方法
由于植物粗提液中含有许多其他物质,如酚类物质、核酸等,而且蛋白质的含量比较低,因而诸如 Folin 酚法,双缩脲法,紫外吸收法等的应用受到了一定的限制,而考马斯亮蓝法灵敏度高,操作简便,特异性强,快速,且不受酚类物质的影响,因而常常在植物组织粗提液中可溶性蛋白质含量的测定中被采纳[4]
但是,目前还不清楚是否所有的植物蛋白质都可以用这种方法测定[5]
2 凯氏定氮法 凯氏定氮法 [6]为经典的测定蛋白质的方法
是目前分析有机化合物含氮量常用的方法,是测定试样中总有机氮最准确的方法之一,被国际国内较多作为1下载后可任意编辑法定的标准检验方法[7]
周燕等[8]进行了八味沉香胶囊中总蛋白质的含量测定,结果可靠,精密度高,重现性好,可作为该品的质量控制方法
韩定献[9]等也采纳此法进行了天力保胶囊中蛋白质和氨基酸
