大肠埃希菌检查法VIP专享

大 肠 埃 希 菌 检 查 法 Escherichia Coli Test Method 1.目 的 建 立 大 肠 埃 希 菌 检 查 法 的 标 准 操 作 程 序 。 2.范 围 适 用 于 大 肠 埃 希 菌 检 查 的 操 作 。 3.责 任 者 QC 化 验 员 。 4.程 序 ： 4.1.简 述 4.1.1. 大 肠 埃 希 菌 (Escherichia coli)即 大 肠 埃 希 菌 ， 为 肠 埃 希 菌 科 埃 希 菌 属的 模 式 种 。 埃 希 菌 属 除 大 肠 埃 希 菌 外 ， 新 近 发 现 有 非 脱 羧 埃 希 氏 菌 等 5 个 种 。 大肠 埃 希 菌 是 人 和 温 血 动 物 肠 道 内 的 栖 居 菌 ， 随 粪 便 排 出 体 外 。 在 药 品 中 检 出 大 肠埃 希 菌 ， 表 明 该 样 品 受 到 人 和 温 血 动 物 的 粪 便 污 染 ， 即 可 能 污 染 肠 道 病 原 体 。 大肠 埃 希 菌 除 普 通 大 肠 埃 希 菌 外 尚 有 致 病 性 大 肠 埃 希 菌 ， 可 引 起 婴 幼 儿 、 成 人 爆 发性 腹 泻 。 为 保 证 人 体 健 康 ， 口 服 药 品 必 须 检 查 大 肠 埃 希 菌 。 4.1.2. 用 4-甲 基 伞 形 酮 葡 糖 苷 酸 (4-Methylumbelliferyl-β-D-glucuronide， MUG)和 靛 基 质 (Indole)试 验 检 查 大 肠 埃 希 菌 是 一 项 新 技 术 ， 其检 验 步骤为 ： 增菌 培养后， 转种 MUG-蛋白胨培养基 培养， 多数情况下不需要从混合菌 中 分离单个 菌 ， 如MUG、 Indole 试 验 为 阳性 或阴性 即 可 报告结果。 4.1.3. 原 理： 利用 目 标 菌 限定酶作 用 的 底物 的 水解产物 ， 产生颜色或荧光反应作 为 指示系统来鉴定目 标 菌 。 实验 证 明 ， 96％的 大 肠 埃 希 菌 含β -葡 糖 苷 酸 酶(β -glucuronidase， GUD)，约10％的 沙门菌 属 一 些菌 种 也含有 此酶。 MUG 被GUD 水解， 产生荧光， 由于 荧光反应的 敏感度较颜色反应强千万倍， 易于 观察， 没有 主观性 ， 因而用 MUG 鉴定大肠 埃 希 菌 已被广泛应用 于 临床、 食品 、 饮水、 污 水等 的 检 测。 单一 的 MUG 鉴别大肠 埃 希 菌 其 漏检 率达6％， 鉴于 98％的 大 肠 埃 希 菌 ...