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糖类测定方法大全

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糖类测定方法大全( 一 )测 定 方 法 概 述(二)可溶性糖类的提取和澄清1、提取液制备(1)常用提取剂 ——水、乙醇(2)提取液中含糖量控制0.5~3.5mg/mL (3)含脂肪食品先脱脂,然后用水提取(4)含淀粉及糊精食品(乙醇沉淀淀粉等)用70~75%乙醇溶液提取(5)含乙醇及 CO2液态食品,蒸发至 1/3 ~1/4 原体积,以除去 C2H5OH及 CO2 (6)酸性食品应先中和防止低聚糖部分水解(7) 提取固体样品有时需要加热,以提高提取效果。一般在40~50℃,防止多糖溶出(8) 乙醇作提取剂加热时应安装回流装置2、提取液的澄清(1)影响测定的杂质色素、蛋白质、果胶、可溶性淀粉、有机酸、氨基酸、单宁,可影响颜色、浑浊、过滤困难。(2)澄清剂① 醋酸铅(中性) Pb(CH3COO)2·3H2O,形成沉淀,吸附杂质,可除去蛋白质、果胶、有机酸、单宁等。② 乙酸锌和亚铁氰化钾二者生成氰亚铁酸锌↓吸附蛋白质等干扰物。③ 硫酸铜和氢氧化钠Cu离子使蛋白质沉淀。(3)澄清剂用量用量适宜,以无新沉淀为准,如2ml 饱和醋酸铅( 30%)、(4)除铅剂由于铅影响还原糖的测定,生成铅糖化合物。常用除铅剂有草酸钠、硫酸钠、磷酸氢二钠。(三)蓝 —爱农( Lane-Eynon)法测定还原糖(国际上常用的定量糖的方法)1、原理斐林试剂甲液( CuSO4·5H2O)斐林试剂乙液(酒石酸钾钠+NaOH)甲、乙混合 →酒石酸钾钠合铜酒石酸钾钠合铜 +葡萄糖→葡萄糖酸+ Cu2O↓(红棕)终点的确定:葡萄糖 +亚甲基蓝(氧化态) →亚甲基蓝(还原态)过量兰色无色(兰色消失)终点时的颜色为:兰色消失了的红棕色2、测定① 预测准确吸取斐林试剂甲液5.00mL、乙液 5.00mL→锥形瓶中, △至沸腾,再加入亚甲基蓝指示剂,在加热的条件下,用样液滴至蓝色褪尽。(先快后慢,要求很快达到终点, 因为亚甲基蓝易被空气氧化为蓝色,且要求在加热的情况下以除去空气)② 测定甲液 5mL、乙液 5mL→ 锥形瓶中, 加入比上述预测量少0.5~1ml 样液在 2min内沸腾,维持沸腾 2min,加入 3 滴亚甲基蓝指示剂,再在3min 内滴定至蓝色褪尽。3、计算 F 还原糖% = --------------------- ×100 ( V1/V ) × m m--样品质量, mg;V1--滴定量 mL;V--样液总 mL;F--还原糖因素, 10mL 费林试剂,相当的还原糖量mg F的求得有两种方法:A、用标准还原糖液用上面同样方法标定10ml 费林试剂求得。B、查蓝 —爱农法专用 “还原糖因数表 ”附...

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