细胞培养中常见的问题讲解VIP专享

细胞培养中常见的问题2006-11-23 15:53 细胞中的颗粒到底是怎么回事？我的细胞总有颗粒， 开始是细胞中有， 后来细胞之间也好像有许多颗粒。好像是细胞碎片一样。是什么东西啊？是支原体污染吗？这可是我刚买回来的细胞啊! 我们实验室也有这种情况， 是不是黑的小碎片， 有人说是细胞代谢产物， 后来拿到高倍镜下看还会动，就怀疑是污染了，也想问问大家到底是什么是黑色的小碎片。 我没注意到它会动， 只是觉得不像是活的微生物。我觉得是由于某种污染或外界因素导致的细胞状态变差，裂解出的东西。 但是，是什么东西不清楚。的确很常见在以前帖子见到说是“黑焦虫”。长时间培养的很容易出现， 我根据自己的经验估计是一种污染，因为随着黑点增多，本来生长旺盛的细胞逐渐停滞甚至死亡。而且我后来原代培养的几批细胞并没有发现，我怀疑有好多细胞系本身就是污染的。不过增加换液次数的情况下，好象一般不太娇气的细胞生长不是很受影响。以前听很有经验的老师说黑焦虫是国产血清的问题，可以有条件换进口血清试试，或者离心一下也可能能解决问题。那么所谓的“黑焦虫”到底是什么东西啊？有谁知道？我培养的细胞也出现过此中问题，放到高倍镜下看时有东西在动， 但培养液不混浊，估计不是细菌污染，可能是血清问题，是支原体污染。我培养的细胞也出现过这样的问题，我个人认为是一种支原体污染。 国产血清是罪魁祸首，因为只要将细胞饥饿一下，不超过24 小时，这种东西就会疯长我培养的细胞也有出现这中情况。但是并不影响细胞生长。 应该不是支原体污染最近，我复苏细胞细胞的时候也发现过这样的东西，尽管我用的是 GIBCO的 FBS，后来，每天换液之前洗几遍后，就慢慢变少，现在没了细胞培养的细菌污染我们新建的细胞室。每周都会做清洁，用0。2%新洁尔灭消毒，照紫外。实验前也会照至少 30 分钟。培养基中加青霉素，链霉素。可是培养细胞时还是常有细菌污染，有时甚至分析不出原因。 用培养瓶还好一点， 用多孔板或平皿就更凄惨。我养的是哺乳动物细胞，不知各位有什么好的方法避免污染！谢谢！很可能是超净台无效了，，或者培养基？其实严格操作箱污染都难我们是新的超净台，不可能失效。而且用同一瓶培养基，一瓶传两瓶，原始的一瓶污染，新传的很好。所以我分析不出原因呀那么假如把原始的那瓶换新瓶养可以么？都污染了，我仍还来不及，那还敢换新瓶染菌有很多原因，因为整个细胞操作过程均要求无菌，所以看看操作是否...