细胞培养讲义汇总VIP专享

细胞培养一．概述生物体是一个高度统一的整体，而细胞生物学的主要对象是生物体内的各种细胞，很显然，在整体条件下研究单个细胞或某一细胞群在体内（in vivo）的功能活动是非常困难的。实际工作中，人们常常从生物体内取出组织或细胞，在体外(in vitro) 模拟体内生理环境，在无菌、 适当温度和一定营养条件下，对这些组织或细胞进行孵育培养，使之保持一定的结构和功能，称为体外培养，体外(in vitro) 培养是在体外进行的生物过程的实验，与体内(in vivo)相对， 也称为组织培养。 通过组织培养可以方便地在体外观察研究细胞的生长发育、细胞形态和功能。根据体外培养物种类不同，严格意义上， 体外培养可分为组织培养（从生物体内取出活的组织（多指组织块）在体外进行培养的方法）、器官培养（生物体内取出的器官（一般是胚胎器官）、器官的一部分或器官原基在体外进行培养的方法）、细胞培养 （将活细胞 （尤其是分散的细胞）在体外进行培养的方法）。1.组织培养 (tissue culture) 指组织在体外条件下维持生长，组织仍可分化并维持其结构和／或功能。2.器官培养 (organ culture) 器官为原基、整个器官或器官的一部分，在体外条件下维持生长或分化并保持结构和／或功能。3.细胞培养 (cell culture) 是将机体内的组织取出分散(机械或酶消化 )成为单个细胞，使其在人工培养条件下保持生长、分裂繁殖、细胞的接触性抑制及细胞衰老过程等生命现象。在细胞培养中，细胞不再形成组织。需要说明的是， 进行组织培养时， 不论采用什么方法和条件，被培养组织的主要成分仍然是细胞；细胞在生长过程中总有移动和其他变化，这将使得培养的组织难以长期维持其特有的结构和功能。 培养时间越长， 发生变动的可能性就越大。结果常使单一类型的细胞保存下来，最终也成了细胞培养。另外， 所谓细胞并不意味着细胞彼此是独立的，细胞之间仍然相互依存，呈现一定组织的特性。所以，组织培养和细胞培养无严格区别，两者在一定程度上可看作是同义语。二．细胞培养的历史细胞培养的工作始于20 世纪初（Harrison ，1907），目前已广泛应用于生物学、医学的各个领域。1.1907：罗斯 ?哈里森（Ross Harrison）报道离体神经纤维生长，首次成功克服基本的培养问题并创造了一种可效仿的细胞培养技术：将蛙胚神经管的组织移植到无菌盖玻片上的一滴新鲜蛙淋巴液中，淋巴液凝块后，将盖玻片反转过来放置在凹玻片的凹窝上方进行悬滴培养，离体观察...