核酸检测在血液筛查中的应用核酸检测在血液筛查中的应用深圳市血液中心深圳市血液中心血液筛查是否需要进行核酸检测血液筛查是否需要进行核酸检测无偿献血的新动态无偿献血的新动态““定期无偿献血者是低危的献血者”定期无偿献血者是低危的献血者”，但是“以体检为目的定期无偿献血，但是“以体检为目的定期无偿献血者是高危献血者”而且这部分人群的者是高危献血者”而且这部分人群的献血队伍正在扩大。这部分人群窗口献血队伍正在扩大。这部分人群窗口期的机率高于其他人群。因为在他们期的机率高于其他人群。因为在他们中间高危的传播行为经常发生。中间高危的传播行为经常发生。经过治疗后的经过治疗后的HBsAgHBsAg转阴，转阴，ELISAELISA方方法检测阴性的献血者。法检测阴性的献血者。NATNAT与与ELISAELISA互补互补病毒变异病毒变异免疫静默期免疫静默期实验操作失误实验操作失误病毒感染的窗口期病毒感染的窗口期病毒检测窗口期病毒检测窗口期项目项目ELISAELISA窗口期窗口期项目项目NATNAT窗口期窗口期HBsAgHBsAg5656HBVHBV2525抗抗-HCV-HCV7272HCVHCV5959抗抗-HIV-HIV2222HIVHIV1111血筛用血筛用NATNAT试剂与临床用的不同试剂与临床用的不同目的和要求不同目的和要求不同定性与定量定性与定量临床使用核酸检测主要目的是定量监测，进行疗效分析。临床使用核酸检测主要目的是定量监测，进行疗效分析。血筛用于病原体的定性筛查血筛用于病原体的定性筛查灵敏度和特异性灵敏度和特异性临床在漏检与误差之间更重视误差临床在漏检与误差之间更重视误差血液筛查用核酸目的是保证用血安全，更重视漏检血液筛查用核酸目的是保证用血安全，更重视漏检质控要求不同质控要求不同临床用与血液筛查用质控要求也不同。临床试剂以定量准确和防临床用与血液筛查用质控要求也不同。临床试剂以定量准确和防止误报为质控目标止误报为质控目标血筛用以防止漏检为主要目的血筛用以防止漏检为主要目的阳性率也不同阳性率也不同临床更多的阳性；血筛更多是阴性临床更多的阳性；血筛更多是阴性对自动化要求不同对自动化要求不同临床更多用于病人临床更多用于病人,,单人份检测单人份检测,,标本量少标本量少血筛更多用于正常人，因此检测量不同，对自动化的要求也不同血筛更多用于正常人，因此检测量不同，对自动化的要求也不同血筛用血筛用NATNAT平台的要求平台的要求灵敏度灵敏度HBVHBV≤≤10IU/ml10IU/ml；；HCVHCV、、HIVHIV≤≤200IU/ml200IU/ml特异性特异性核酸的特异性高，几乎没有方法学假阳性核酸的特异性高，几乎没有方法学假阳性但要防止污染但要防止污染内标（内对照）内标（内对照）为避免假阴性，要求每管阳性质控为避免假阴性，要求每管阳性质控自动化自动化大规模、高通量大规模、高通量关于灵敏度的几个问题关于灵敏度的几个问题厂家宣传的灵敏度均指单人份检测，而非推荐厂家宣传的灵敏度均指单人份检测，而非推荐poolingpooling方案的实测灵敏度方案的实测灵敏度实际应用灵敏度实际应用灵敏度==宣传灵敏度宣传灵敏度×pooling×pooling数数IUIU才有可比性：才有可比性：WHOWHO标准品以及国家一级标准品均标准品以及国家一级标准品均以以IUIU为单位为单位HCVHCV、、HIVHIV窗口期浓度高，因此对灵敏度要求较低窗口期浓度高，因此对灵敏度要求较低。。美国美国FDAFDA要求，要求，HCVHCV、、HIV5000IU/mlHIV5000IU/ml能在能在poolingpooling方案方案中被检出中被检出HBVHBV的窗口期标本在的窗口期标本在30-300IU/ml30-300IU/ml之间，因此对灵之间，因此对灵敏度要求高敏度要求高低于灵敏度也有检出的可能，这与取样几率有关低于灵敏度也有检出的可能，这与取样几率有关血液筛查常用的血液筛查常用的NATNAT技术技术核酸提取均使用磁珠法磁珠提取的原理：磁珠提取的原理：将磁珠上标记特异性吸附核酸的物质特异性吸附将磁珠上标记特异性吸附核酸的物质特异性吸附核酸，并通过磁分离技术将病毒核酸从裂解液中核酸，并通过磁分离技术将病毒核酸从裂解液中提取出来提取出来步骤：步骤：裂解裂解——吸...
