抗体的人工制备VIP免费

人工制备抗体人工制备抗体多克隆抗体（多克隆抗体（polyclonalantibodypolyclonalantibody））单克隆抗体（单克隆抗体（monoclonalantibodymonoclonalantibody））基因工程抗体（基因工程抗体（geneticengineeringantibody)geneticengineeringantibody)（一）（一）多克隆抗体多克隆抗体（（polyclonalantibody(PcAb)polyclonalantibody(PcAb)用传统方法将抗原物质免疫动物用传统方法将抗原物质免疫动物,,由于这些物质由于这些物质由多种抗原分子组成或由多种抗原决定簇组成由多种抗原分子组成或由多种抗原决定簇组成,,可刺激不同淋巴细胞克隆可刺激不同淋巴细胞克隆,,产生多种产生多种Ig,Ig,即多克即多克隆抗体。隆抗体。由此获得的抗血清是一种多克隆的混合抗体，具由此获得的抗血清是一种多克隆的混合抗体，具有高度的异质性。有高度的异质性。缺点缺点它不能针对某一特定表位，特异性不高，它不能针对某一特定表位，特异性不高，常出现交叉反应；常出现交叉反应；同时也不易大量制备，其应用受到限制。同时也不易大量制备，其应用受到限制。多克隆抗体主要来源于多克隆抗体主要来源于动物免疫血清动物免疫血清恢复期患者血清恢复期患者血清免疫接种人群免疫接种人群PcAbPcAb制备的基本过程制备的基本过程抗原制备抗原制备动物免疫动物免疫试血测定抗体效价试血测定抗体效价血清分离与保存血清分离与保存多抗纯化与标记多抗纯化与标记用于制备抗血清的动物用于制备抗血清的动物小鼠、小鼠、大鼠、大鼠、兔、兔、羊、羊、马等大动物。马等大动物。（二）单克隆抗体（二）单克隆抗体（（monoclonalmonoclonalantibodyantibody，，McAbMcAb））由单一由单一BB细胞克隆针对某一抗原决定簇产生细胞克隆针对某一抗原决定簇产生的完全均一的只对某一抗原决定簇起反应的的完全均一的只对某一抗原决定簇起反应的特异性抗体特异性抗体,,即为单克隆抗体。即为单克隆抗体。通过杂交瘤技术获得。通过杂交瘤技术获得。针对一个抗原决定簇针对一个抗原决定簇由一个由一个BB细胞分化、细胞分化、增殖产生的子代细胞集增殖产生的子代细胞集团产生的，团产生的，针对一个抗原决定簇的抗体，即由单一针对一个抗原决定簇的抗体，即由单一BB细胞细胞克隆合成的抗体。克隆合成的抗体。特点：特点：1.1.高度均一性高度均一性2.2.高度专一性高度专一性3.3.大量产生大量产生4.4.及稳定性及稳定性应用应用作为诊断试剂用于许多血清学检测作为诊断试剂用于许多血清学检测;;已广泛应用于疾病的诊断、已广泛应用于疾病的诊断、特异性抗原或蛋白的检测和鉴定、特异性抗原或蛋白的检测和鉴定、疾病的被动免疫治疗疾病的被动免疫治疗或与核素、毒素、化学药物偶联导向药或与核素、毒素、化学药物偶联导向药物物,,用于肿瘤治疗。用于肿瘤治疗。单克隆抗体的生产单克隆抗体的生产动物体内生产系统动物体内生产系统细胞培养生产系统细胞培养生产系统动物体内生产系统动物体内生产系统将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔，杂交瘤细将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔，杂交瘤细胞可在小鼠腹腔中无限繁殖，导致腹水胞可在小鼠腹腔中无限繁殖，导致腹水产生，每毫升腹水可获得产生，每毫升腹水可获得5~20mg5~20mg的单克的单克隆抗体，一般一次可收腹水隆抗体，一般一次可收腹水5~10mL,5~10mL,间间隔隔3~4d3~4d采一次，可多次反复采集。采一次，可多次反复采集。选择培养基选择培养基常用常用HATHAT选择培养基，选择培养基，HH为次黄嘌呤为次黄嘌呤（（hypoxanthinehypoxanthine））,T,T为胸腺嘧啶核苷（为胸腺嘧啶核苷（thymidine)thymidine)，二，二者都是旁路合成者都是旁路合成DNADNA的原料；的原料；AA是氨基喋呤是氨基喋呤（（aminoplerinaminoplerin））,,是细胞合成是细胞合成DNADNA的阻断剂。的阻断剂。在在DMEMDMEM培养基中加入培养基中加入HH、、AA、、TT三种成分即制成三种成分即制成HATHAT选择培养基，在该培养基中，未融合的骨髓瘤细胞选择培养基，在该培养基中，未融合的骨髓瘤细胞不能生长，因它缺乏不能生长，因它缺乏HGPRTHGPRT酶下能利用旁路途...