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真菌检查真菌检查真菌真菌一.概述(真菌及其检验的基本特征)种类繁多分布极广与人关系密切(一)定义真菌是真核细胞型微生物有细胞壁和完整的核以腐生或寄生的方式摄取养料不含叶绿素少数为单细胞大多为多细胞能进行有性生殖和无性繁殖细胞壁:不含肽聚糖含几丁质及纤维素(二)分类生物学分类与医学有关的真菌↓无鞭毛菌门:接合菌亚门子囊菌亚门担子菌亚门半知菌亚门(病原性真菌)临床分类(按致病部位)浅部真菌深部真菌形态学分类单细胞真菌多细胞真菌真菌的形态与结构在鉴定上起重要作用(三)生物学形状1.形态与结构单细胞:圆形/卵圆形母细胞出芽并脱离母细胞成为子细胞(新的繁殖体)--酵母菌(酵母样菌)假菌丝多细胞:菌丝与孢子交织成团菌落疏松呈丝状---丝状菌(霉菌)菌丝---成熟孢子在适宜条件下长出芽管逐渐延长呈丝状\有隔菌丝(大多致病真菌)无隔菌丝气生菌丝营养菌丝\菌丝体(菌丝交织成团)形态大小不一(螺旋状球拍状鹿角状)菌丝间有无分隔→鉴别真菌形状特征(绒毛状絮状粉末状)孢子----是真菌的繁殖器官有性孢子:卵孢子接合孢子子囊孢子担子孢子无性孢子:芽生孢子厚壁孢子关节孢子分生孢子孢子囊孢子芽生孢子:(常见于隐球菌念珠菌)母孢子发芽形成→与母体脱离→新个体\芽体延长互相连接(不脱离母体)↓假菌丝厚壁孢子:为休眠孢子菌丝内胞浆浓缩胞壁增厚而成(环境不适时形成)真菌种类不同孢子形状大小也不同→鉴别真菌假丝酵母菌(白色念珠菌)酵母菌出芽繁殖多细胞真菌形态形态孢子菌丝芽生孢子厚膜孢子关节孢子孢子囊孢子假菌丝2.培养特性培养条件:营养:一般细菌用培养基上都能生长沙保(Sabouraud)培养基温度:22~28℃℃(深部真菌:28/37)℃℃PH:4.0~6.0(弱酸性)需氧湿度高生长速度:慢(1~4周见典型菌落)菌落特征:酵母/酵母样菌:光滑柔软湿润丝状菌:疏松(绒毛状棉絮状粉末状)颜色(正/背面)(四)临床意义若在人体正常无菌部位分离到非病原性真菌且37℃生长加上临床表现可视为该病人的病原体全身性真菌病:病原性真菌:组织胞浆菌芽生菌-----急慢性/局部肉芽肿性炎症隐球菌条件致病菌:念珠菌曲霉菌毛霉菌浅部真菌病:皮肤真菌瓶形酵母白色念珠菌皮下真菌病:较少见其他:真菌过敏真菌中毒真菌毒素致癌(五)真菌检验常用技术标本采集:皮肤指甲毛发血液脑脊液胸腹水脓液口咽泌尿生殖道(注意正常菌群的污染)直接检查染色检查:棉兰染色分离培养:培养基-----Sabourad培养基(非选择培养基)选择培养基鉴别培养基培养方法----试管法(初代培养菌种保存)大培养(斜面纯种的培养研究)小培养(玻片菌种鉴定)(玻片法钢圈法方块法)其他(六)微生物学检查1.标本:毛发皮(甲)屑痰血脑脊液分泌物穿刺液2.真菌检验非培养法:直接镜检:染色标本(乳酸酚棉兰染色)不染色标本→观察菌丝/孢子形态其它染色墨汁负染------新型隐球菌(荚膜)10%KOH------癣菌(菌丝孢子)抗原检出:隐球菌荚膜多糖抗原白色念珠菌甘露聚糖抗原培养法:试管法---初代培养菌种保存大培养---纯种的培养研究小培养---菌种鉴定(玻片法钢圈法方块法)二.深部真菌侵犯表皮以外组织和器官的病原真菌和条件致病性真菌酵母和酵母样菌丝状菌二相性真菌(一)念珠菌属白色念珠菌热带念珠菌近平滑念珠菌1.临床意义条件致病菌:正常存在于人的口咽部、肠道、阴道黏膜浅部感染:皮肤/粘膜念珠菌病(指间糜烂鹅口疮口角炎阴道炎)深部感染:支气管肺念珠菌病念珠菌性肠炎念珠菌性心内膜炎2.微生物学检查直接检查直接镜检:革兰染色阳性圆形/卵圆形芽着色不均假菌丝抗原检测:检测白色念珠菌甘露聚糖抗原分离鉴定:芽管形成试验糖同化/发酵试验厚壁孢子形成试验动物试验克玛嘉显色培养基上:绿色菌落(可与其它的假丝酵母菌相区别)(二)隐球菌属新型隐球菌:人类病原菌经呼吸道感染→由肺入血液→侵犯肺、脑/脑膜→隐球菌肺炎、脑病荚膜多糖抗原结构不同-----四种血清型(ABCD)致病物质:荚膜多糖微生物学检查:...

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