项目二血型与输血任务二Rh血型鉴定第四节Rh血型概念一、Rh血型抗原抗原性强弱次序为D>E>C>c>eRh阳性：含D抗原Rh阴性：不含D抗原亚型中，以Du最有临床意义，易被误定为Rh阴性。二、Rh血型抗体免疫性抗体：抗D抗体最强，其次是抗c和抗E。IgG、免疫产生、小、可通过胎盘，温性抗体、需要抗人球蛋白等介质才能与相应红细胞凝集三、Rh血型的遗传和命名四、Rh血型鉴定是否含有D抗原因Rh抗体多为不完全抗体，所以多采用酶介质、抗人球蛋白等试验方法。（一）聚凝胺法【原理】聚凝胺：产生很多阳离子低离子强度溶液：降低红细胞的Zate电位红细胞表面含D抗原，与抗D抗体凝集柠檬酸盐解聚液：消除聚凝胺的正电荷，使正常红细胞的非特异性凝集解散，而抗原抗体引起的凝集仍然存在聚凝胺低离子强度溶液柠檬酸盐解聚液（二）酶介质法【原理】酶（木瓜酶、菠萝酶等）可破坏红细胞表面带负电荷的唾液酸，降低红细胞表面负电荷，使红细胞之间排斥力减小，红细胞间距缩小，在不完全抗体的作用下发生凝集。（三）抗人球蛋白法【原理】：不完全IgG类抗D抗体,使红细胞致敏,加入经一定稀释的抗人球蛋白血清后,将致敏红细胞连接，发生肉眼可见的凝集。实践操作用PH6.8-7.2的生理盐水配制2-3%的红细胞悬液，洗涤1次加入抗D抗体与红细胞悬液各一滴于玻璃试管中混合并在室温下（18—25℃）15分钟.离心15秒钟,观察结果.出现凝集为阳性不出现凝集为阴性,对于阴性结果应再做的DⅥ和弱D型的测试注：该抗D抗体为IgG/IgM单克隆鉴定抗体混合型，其中IgMAnti-D可直接凝结D阳性红细胞，除了D4型和弱D(亚D)的一部分。IgGAnti-D通过间接的抗蛋白测试方法凝结D4和低浓度的弱D(亚D).五、Rh血型的临床意义（一）Rh血型与输血（二）Rh血型与新生儿溶血病Rh阴性Rh+抗D抗D第二次复习思考题1、Rh血型中抗原性最强、临床意义又最大的抗原是：2、因为Rh抗体多为抗体，所以常采用、、等方法。3、Rh血型不合引起的新生儿溶血病的原因：Rh的母亲孕育了Rh胎儿后，胎儿红细胞可通过胎盘屏障进入母体的血循环中，刺激母体产生，该抗体进入胎儿体内而发生新生儿溶血病。由于第一胎产生的抗体效价较低，一般对胎儿无明显影响。但第二胎时抗体效价增高，易引起新生儿溶血病。复习思考题4、木瓜酶可破坏红细胞表面带负电荷的，降低红细胞表面负电荷，使红细胞之间排斥力减低，红细胞间距，在不完全抗体的作用下发生凝集。5、抗人球蛋白可与红细胞上结合的结合，将致敏红细胞连接，发生的凝集。三、ABO血型抗体（一）天然抗体（二）免疫抗体IgMIgG天然抗体与免疫抗体的鉴别特性天然抗体（）免疫抗体（）抗原刺激分子量与红C反应最适温度对血型物质的作用能否通过胎盘与红C反应的介质无察觉有抗原刺激（妊娠、输血）大小4-25℃37℃易被血型物质中和大多不能被血型物质中和不能能盐水介质酶、抗人球蛋白等IgMIgG四、ABO血型的亚型亚型：属同一血型抗原，但抗原结构和性能或抗原位点数不尽相同的情况A型：A1A1和A抗原，血清中含有抗B抗体A2只有A抗原，血清中含抗B和抗A1抗体五、ABO血型的遗传A和B为显性基因，O为隐性基因举例：ABAOBOABAOBOOO任务一（第三节）ABO血型鉴定一、标本的采集柠檬酸钠抗凝剂二、红细胞悬液的配制1、洗涤：2、配制2％～5％的红细胞悬液5％红细胞悬液＝比容红细胞1滴＋生理盐水1ml2％红细胞悬液＝比容红细胞1滴＋生理盐水2ml三、标准血清要求1、特异性2、效价3、亲和力4、不含冷凝集素5、不含补体，无任何污染四、标准红细胞悬液的制备五、ABO血型鉴定方法正定型：反定型：（一）试管法：（二）玻片法；用已知抗A、抗B和抗A＋B分型血清来测定红细胞上有无相应的A、B抗原：用已知A抗原和B抗原红细胞来测定血清中有无相应的抗A、抗B抗体。（三）注意事项1、严格查对2、操作方法应按规定先加血清，再加红细胞悬液，3、试验用器材应清洁干燥4、玻片法勿将干涸的红细胞聚集误认为凝集5、反定型一般不宜采用玻片法6、试管法离心后应先观察上清有无溶血对于工作人员1%的错误，病人...
