果蝇形态观察培养及杂交方法VIP免费

果蝇（Drosophila）形态观察与培养实验目的了解果蝇生活史中各个不同阶段的形态特点；区别雌雄果蝇以及几种常见突变类型的主要性状特征；掌握果蝇实验培养和杂交方法和技术。实验材料普通果蝇的三个品系实验原理（一）果蝇的形态和生活史1.果蝇的生活史果蝇是完全变态昆虫，它的生活史包括卵、幼虫、蛹及成虫四个发育时期。果蝇生活周期以及各发育阶段的时间长短与温度关系十分密切。超过30℃，能使果蝇不育和死亡。温度降低，会使果蝇生活周期延长，生活力降低。一般在20-25℃下培养最为合适。在适宜的温度下，大约经过10-15天即可繁殖一代。果蝇属双翅目的昆虫，与其它目别的昆虫不同处是其它目别的昆虫具有两对翅膀，也就是有四支翅膀，双翅目的昆虫只具有一对，也就是两支翅膀，原因是另外的一对翅膀退化成为平衡棒。2.果蝇的形态1）果蝇雌雄外形判别体型腹部末端（形状与结构）腹部背面黑纹性梳腹节数体型大小，雌果蝇(下图左侧)大于雄果蝇(下图右侧)雌果蝇6节，腹部底部为产卵管，呈现圆锥状凸出。雄果蝇4节，腹部底部为交尾器，呈现黑色圆形外观。雄果蝇在前肢先端第二节具有性梳性梳性梳果蝇的突变型影响部位突变名称基因符号性状特征染色体号数翅形残翅vg翅退化Ⅱ小翅m翅小Ⅰ(X)勺状翅nub2翅小似勺Ⅱ翘翅cy翅后翻Ⅱ眼白眼w复眼白色Ⅰ(X)棒眼B复眼棒状Ⅰ体色黑檀体e体色黑亮Ⅲ黑体b体色黑Ⅱ黄体y体色浅橙黄色Ⅰ刚毛焦刚毛sn3刚毛卷曲Ⅰ叉刚毛f刚毛近中部分叉Ⅰ2）果蝇外表型态A.身体颜色野生型：灰色，符号为+突变型：黄体yellowbodycolor符号为y黑檀体：ebony，e，身体乌黑色。黑体：black，b，身体黑色。B.眼睛颜色野生型：red眼睛颜色为砖红色，符号为+突变型白色white眼睛颜色为白色，符号为w朱红色vermilion眼睛颜色呈现亮红朱色，符号为v墨黑色sepia眼睛颜色呈现墨黑色，符号为seC.眼睛形状野生型：饱满圆形符号+棒状型：Bar组成复眼的小眼数目减少，造成眼睛外框变大，符号BD.翅膀形状野生型翅膀呈圆卵型，静止时平放交叉重迭，长度约为腹部长度的两倍符号为+小翅（短翅）：miniature翅膀长度缩短，约略盖过腹部尾部，符号m卷翅型，Curly翅膀卷曲，尾端上翘，符号Cy残翅型，vestigial翅膀退化残缺不全，符号vg粗短翅型，dumpy，翅膀缩短呈三角形，符号dpE.翅膀横隔脉野生型，具有横隔脉，符号+突变型，crossveinless缺横隔脉，符号cvF.刚毛Bristle野生型，头胸部以及复眼的周围具有平直，先端略弯的长型粗黑硬毛，符号+突变型焦刚毛（卷刚毛）突变型短刚毛，stubble刚毛缩短变粗，符号Sb分叉刚毛，forked刚毛先端分叉弯曲，符号f影响部位突变名称基因符号性状特征染色体上座位残翅vg翅退化II翅形小翅m翅小I(X)36.1眼色白眼w复眼白色I(X)1.5体色黑檀体b体色黑亮Ⅲ刚毛焦刚毛sn3刚毛卷曲I(X)21.0实验中使用的果蝇品系的突变性状（二）果蝇的培养培养酵母玉米培养基米粉培养基香蕉培养基培养基配方可调整：一般保种时（培养温度低），要稀一点，杂交实验时要稍稠一点。果蝇培养基配方（80-100ml）琼脂蔗糖(红糖)玉米粉水酵母粉丙酸苯甲酸钠0.8g6g8g80ml0.8g0.5ml0.1g配制方法：量出所需水量，取一半于烧杯中，将琼脂剪碎后加入，煮沸，小火煮沸一会儿，搅拌使琼脂充分溶解，然后加入蔗糖，搅拌溶解；将另一半水与玉米粉及苯甲酸混合搅拌后，加入煮沸的上述溶液中，不断搅拌，沸腾后，小火保持2min。关火，待培养基冷却至50－60℃时，加入丙酸搅拌均匀，然后加入酵母粉搅拌均匀，然后分装。每瓶培养基高度为1－2㎝，注意不要沾到瓶口上，不要污染棉塞。（三）果蝇杂交方法介绍注意：本实验使用杂交实验的方法进行果蝇纯种扩大培养，不要使各品系混杂。麻醉取种雌雄鉴别杂交注意：雌体必须是处女蝇（初孵8h（12h）不交配，杂交实验时，每组早晨7点到实验室倒掉培养瓶内的成蝇，下午上实验课时用瓶内新孵出果蝇做实验。）子蝇孵出前（一般一周），倒掉亲代，以免混交F1代计数要在杂交后20d内进行，以免F2与F1混杂实验内容1.果蝇麻醉：麻醉瓶的制作2.果蝇形态观察，雌雄鉴定3.配制培养基（注意必须等培养基凉透后，用灭菌脱脂棉擦干瓶壁的水后...