抗核抗体•自身抗体:指抗自身组织、器官、细胞及其成分的抗体•ANA:指抗细胞核成分(DNA,RNA,蛋白质和酶)的抗体。ANA存在一个谱•ANA新概念:抗核酸(Nucleicacid)和核蛋白(Nucleoprotein)抗体的总称•某些核抗原成分在核仁和胞浆内比核质内更丰富ANA检测的意义•有助于疾病的诊断,如抗Sm是SLE标记抗体;抗ScL-70是SD的标记抗体,抗Jo-1是PM/DM的标记抗体•观察疾病活动度和治疗反应•研究发病机理ANA由来中性粒细胞DNP(DNA-Histone)+抗DNP+补体均质体LE细胞LE细胞:并非SLE特有,PM、SD、RA、SS等结缔组织病,药物过敏,慢活肝等亦可阳性。抗DNP取代LE细胞的检测+荧光显微镜下ANA的染色型别•均质型:与抗组蛋白和抗DNA有关•斑点型:与抗ENA有关•周边型:与抗dsDNA有关•核仁型:4-6sRNA•着丝点型:在SD及CREST中出现ANA的筛选:间接免疫荧光法++抗原抗体(血清)抗原—抗体第二抗体ANA的筛选:间接免疫荧光法ANA分类•抗DNA(dsDNA,ssDNA)•抗组蛋白(Histone)•抗非组蛋白(Non-histone,ExtractableNuclearAntigen,ENA)•抗核仁(Nucleolus)抗双链DNA抗体(短膜虫免疫荧光法)•病例数阳性率(%)•正常人1100•系统性红斑狼疮64•活动期3193.6•缓解期333.0•类风湿关节炎601.8•硬皮病130•多发性肌炎80•干燥综合症150•白塞病50•非结缔组织病2221.7抗双链DNA抗体(短膜虫免疫荧光法1:5)病例数阳性率(%)正常人1100系统性红斑狼疮64活动期3193.6缓解期333.0类风湿关节炎601.8硬皮病130多发性肌炎80干燥综合症150白塞病50非结缔组织病2221.7抗组蛋白抗体(酶联免疫吸附法X2SD)•系统性红斑狼疮50%•其他结缔组织病23-30%•服异烟肼12月以上53%•服苯妥因钠6月以上18%•服他巴唑6个月0活动期SLE90.2%阳性抗H1H2AH2BH2A-H2BH3H4系统性红斑狼疮+++++++++++长期服异烟肼+++++++++++++类风湿关节炎++++++SLE以IgG型抗组蛋白抗体为主,而长期服烟肼及RA病人以IgM型为主抗组蛋白抗体(免疫印迹法)几种ENA的由来及同义词•Sm:病人名:Smith•RNP:u1RNP或nRNPNuclearRibonucleoprotein•SSA:ROSjogren’ssyndromeA•SSB:La,Ha,Sjogren’ssyndromeB•Jo-1:病人John•ScL-70:Scleroderma常见结缔组织病的抗核抗体的阳性率•ANAdsDNAHistoneSmnRNPSSASSBScL-70Jo-1着丝点核仁SLE90(62)50(25)4039100006SS501530014(75)(59)0009SD75527012195300(20)(39)PM/DM501305000(20)010RA2310230020500015++有指端硬化ANA1:40(+),抗dsDNA30%(或1:5)(+)抗核仁抗体(底物HEP-2细胞,免疫光法)•病例数阳性率•正常人1000•系统性红斑狼疮906•类风湿关节炎2515•硬皮病7539•多发性肌炎5010•干燥综合症609•非结缔组织病1000几种核抗原分子特性NativeDNA(dsDNA)HistoneH1,H2A,H2B,H3,H4Smu1u2u4u5u6SnRNA复合物三种主要核蛋白带:B’(29),B(28);三种主要核蛋白带:B’(29),B(28);D(16);E(13)Kd;与信使RNA前体拼接有关.RNP(u1RNP)u1SnRNA复合物二种主要核蛋白带:70kd22kd(c)及33kd(A).SSA/ROY1-Y5RNA复合物,60kd和52kd核蛋白。SSB/La,Ha多聚酶转录中的磷酸蛋白质(主要为48kd).几种核抗原分子特性Ku70kd和80kd与DNA结合的蛋白质rRNP与胞浆中核糖体有关,15kd,16kd,38kd磷酸蛋白PCNADNA多聚酶,(36kd)ScL-70DNA拓扑异构酶,100kd天然蛋白,70kd变性蛋白Jo-150kd/60kd组氨酸-tRNA合成酶PM-ScL(PM-1)11种蛋白质复合物,分子量在110kd-20kdCentromere17kd,80kd,140kd三种染色体蛋白,亦称着丝点蛋白小结•ANA是诊断弥漫性结缔组织病的重要依据。各种抗原在其分子量、结构、功能上有所不同。抗原同DNA的转录、拼接、复制、翻译等作用有关。研究ANA有利于对结缔组织病发病机理的了解•ANA滴度不一定与疾病活动性相平行,正常人、尤其老年人可有低滴度ANA。感染性疾病、肿瘤也可阳性小结•抗双链DNA对诊断SLE高度特异,并与疾病活动有关。DNA-抗DNA免疫复合物在狼疮肾炎中起重要作用•抗Sm:是SLE标记抗体,帮助前瞻性和回顾性诊断,常与nRNP抗体共存小结•抗nRNP在多种结缔组织病中存在,高滴度有利于MCTD的诊断。nRNP抗原与rRNP不同,前者是...