检验教研室焦荣华免疫球蛋白与抗体湖南环境生物职业技术学院概述免疫球蛋白与抗体白蛋白球蛋白球蛋白球蛋白正常血清免疫血清白蛋白球蛋白球蛋白球蛋白抗原正常人血清电泳图•抗体(antibody,Ab):B细胞识别抗原后增殖分化为浆细胞所产生的能与相应抗原发生特异性结合的具有免疫活性的球蛋白。•免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig):具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白。Ab与Ig都属于γ球蛋白免疫球蛋白的存在方式•分泌型(secreted~,sIg)主要存在于体液中,具有抗体的各种功能;•膜型(membrane~mIg)是B细胞膜上的抗原受体(BCR),识别抗原并启动B细胞的活化免疫球蛋白与抗体的关系抗体是功能学概念,免疫球蛋白是结构学概念抗体是免疫球蛋白,但免疫球蛋白不一定是抗体抗体存在于体液中,免疫球蛋白可存在于体液中及某些细胞的细胞膜上免疫球蛋白的结构免疫球蛋白与抗体一、免疫球蛋白的基本结构由两条相同的短链(轻链、L链)和两条相同的长链(重链、H链)通过二硫键连接而成的四肽链。一、免疫球蛋白的基本结构轻链由214个氨基酸组成重链由450-550个氨基酸组成线性肽链是氨基酸通过肽键连接而成,一端游离一个氨基(氨基端-N端),另一端游离一个羧基(羧基端-C端)二、免疫球蛋白的结构分区二、免疫球蛋白的结构分区位于CH1与CH2之间,含有丰富的脯氨酸,易伸展弯曲,而且易被木瓜蛋白酶、胃蛋白酶等水解。恒定区(C区)可变区(V区)铰链区(hingeregion)近N端的1/2L链和1/4(或1/5)H链,氨基酸的组成及序列变化较大而得名近C端的1/2L链及3/4(或4/5)H链。氨基酸组成在同一物种的同一类Ig中相对稳定。可变区超变区:重链和轻链V区各有3个区域的氨基酸组成和排列顺序高度可变,称为超变(hypervariableregion,HVR)或决定簇互补决定区(complementarydeterminingregion,CDR),分别为CDR1、CDR2和CDR3。6个CDR组成一个抗原结合部位。骨架区:CDR以外区域的氨基酸组成和排列顺序相对不易变化,称为骨架区(frameworkregion,FR)。三、免疫球蛋白的种类根据重链恒定区的差异,重链有五种,分别为μ链、δ链、γ链、α链和ε链,对应的免疫球蛋白可分为五类gM、IgD、IgG、IgA和IgE三、免疫球蛋白的种类IgG、IgD、IgE以单体形式存在IgM以五聚体形式存在IgA可以双倍体及单体两种形式存在四、抗体的功能区或结构域功能区:是不连续,紧密折叠的区域,由重链和轻链经链内二硫键连接而成的球状结构,因具有某种生物学功能,又称为功能区。AgBinding抗原结合位点ComplementBindingSite补体结合位点,活化补体PlacentalTransferIgG胎盘转移BindingtoFcReceptorsFC段受体,亲细胞活性同种异型抗原决定簇存在部位,遗传标志促进可变区与抗原表位结合;暴露补体结合位点,活化补体VLVHCLCH1CH2CH3抗体的功能区作用VH+VL——一个抗原结合位点结合抗原表位CH+CL种属型标志——Ig的免疫原性(IgG)CH2(IgM)CH3(IgG)CH2C1q——的结合位点结合补体结合胎盘FcRn——介导IgG通过胎盘(IgG)CH3结合FcR——调理作用(MC,M,B,NK)ADCC(IgE)CH2+CH3结合FcR——I型超敏反应(肥大细胞,嗜碱性粒细胞)五、免疫球蛋白水解片段水解酶作用位点水解片段及其功能木瓜蛋白酶铰链区重链间二硫键近N端(1)两个相同的Fab段:可与抗原结合(2)一个Fc段:激活补体、结合细胞、通过胎盘胃蛋白酶铰链区重链间二硫键近C端(1)一个具有双价活性的F(ab’)2段:可同时结合两个抗原表位(2)若干个小分子多肽碎片(pFc’):无生物学作用免疫球蛋白的生物学功能免疫球蛋白与抗体免疫球蛋白的生物学功能结合抗原结合并激活补体调理作用介导细胞毒作用(ADCC)诱导过敏反应作用穿越胎盘与粘膜上皮)调节作用1、特异性结合抗原(首要功能)抗体分子及酶解片段:Fab1价/单体(IgG,IgE,F(ab’)2):2价/二聚体(分泌型IgA):4价/五聚体(IgM):5价中和效应——中和毒素和病毒与Ag结合——促吞噬细胞吞噬中和毒素和病毒外毒素或病毒与抗体结合后,结合位点被抗体封闭阻止其进入细胞内中和毒素封闭病毒的Ab阻止细菌粘附2、激活补体IgG1、IgG2、IgG3和IgM通过经典途径补体IgG4、...