在线设计基因、lncRNA的siRNA/shRNA序列siDirectDSIRSigmainvivogenRNAiCodex12345siDirect(寻找基因、lncRNA的siRNA序列)1网址:http://sidirect2.rnai.jp/siDirect1:输入基因的accessionnumber(NCBI)siDirect2:点击,自动出现对应序列3:点击,设计siRNAsiDirect点击options,可设置其他参数点击options,网站会给出一系列的siRNA及其他判断信息,如Tm值,脱靶效应,GC含量等siDirectsiDirect以小鼠HOXC6为例,accessionnumber为NM_010465.2siDirect红框处即为得到的siRNA序列,包含正义链(上行)和反义链(下行)siDirect以人LINC01018为例,accessionnumber为NR_024424.2DSIR(寻找基因、lncRNA的siRNA/shRNA序列)2网址:http://biodev.extra.cea.fr/DSIR/DSIR.htmlDSIRDSIR1:输入基因名2:输入FASTA序列DSIR3:选择要设计的序列要求4:运行DSIR以小鼠HOXC6为例,NCBI中找到小鼠HOXC6的转录本序列DSIR选择siRNA21nt,点击运行网站会按照评分高低,将设计的siRNA排序,且去掉评分在90分以下得siRNA,我们只要选择排在前面得siRNA即可。SS为正义链,AS为反义链DSIRDSIR以人LINC01018为例Sigma(寻找基因、lncRNA的shRNA序列)3网址:http://www.sigmaaldrich.com/china-mainland/zh/life-science/functional-genomics-and-rnai/sirna/mission-predesigned-sirna.htmlSigma输入基因名或基因IDSigmaSigma以HOXC6为例点击shRNASigma此处包含种属信息,可根据需要选择好种属,然后点击价格SigmaProductDetails下面出现VALIDATED,即为验证过的序列。一般倾向选择CDS区的shRNA。sigma一般为pLKO.1载体,其shRNA序列一般为:5’CCGG—21bpsense—CTCGAG—21bpantisense—TTTTTG3’正义链反义链Sigma该网站有关lincRNA的沉默序列非常少;因此不建议选用该网站设计shRNA序列invivogen(寻找基因的siRNA序列)4网址:https://www.invivogen.com/sirnawizard/design.phpinvivogen1:输入基因名2:输入编码序列invivogen3:点击搜索invivogen以小鼠HOXC6为例,NCBI中找到小鼠编码区的HOXC6序列invivogen点击搜索后即可得到上述siRNA序列信息RNAiCodex(寻找基因的siRNA序列)5网址:http://cancan.cshl.edu/cgi-bin/Codex/Codex.cgiRNAiCodexRNAiCodex搜索形式多样,如基因symbol、Accessionnumber、EnsemblID等种属包含:人、小鼠、大鼠RNAiCodex以人HOXC6为例,选择Symbol,输入基因名,选择种属人,点击提交;结果中点击箭头所示的编号,即可出现序列信息(红色序列即为siRNA序列)小结网站名类型适用范围检索方式种属网址siDirectsiRNAshRNAgenelncRNAaccessionnumber不限http://sidirect2.rnai.jp/design.cgiDSIRsiRNAshRNAgenelncRNAgenename&FASTA不限http://biodev.extra.cea.fr/DSIR/DSIR.htmlSigmashRNAgenelncRNA(少)genename/symbol/ID人/小鼠/大鼠https://www.sigmaaldrich.com/china-mainland/zh/life-science/functional-genomics-and-rnai/sirna/mission-predesigned-sirna.htmlinvivogensiRNAgenegenename&编码序列不限https://www.invivogen.com/sirnawizard/design.phpRNAiCodexsiRNAgenegenesymbol等人/小鼠/大鼠http://cancan.cshl.edu/cgi-bin/Codex/Codex.cgi设计的目标序列建议在NCBIBLAST哦,(www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST)其他方便快捷的siRNA网站有待后续挖掘更新!