生物技术药物的质控体系—质量标准研究内容 检定方法、质控标准 理化性质:外观(形状、颜色、气味)、pH 均一性:纯度、浓度 鉴别 结构确证 效价:生物学活性、免疫学活性 残余杂质:产品、工艺、环境相关的杂质 起草、制定《制造与检定规程》 研究建立国家标准品或参考品 重组蛋白质药物质量标准研究 效价:生物学活性与比活性 蛋白质纯度 蛋白质含量 理化性质鉴定(部分非常规) 残余杂质 安全性及其它项目 一 生物学活性及比活性测定 (一) 检测意义 获取准确的效价信息,保证产品有效 效价:有效性指标,反映药品效力 生物学活性才能真实反映生物技术药效价 原因:生物制品分子大、结构复杂、不稳定,使得重量与效价不一致 生物制品技术药:~单位(U、AU、IU) (二) 生物学活性测定方法分类 1、动物基础的活性测定 离体动物器官法:脑利钠肽的兔主动脉 体内测定法: EPO 的小鼠网织红细胞 2、细胞基础的活性测定 促细胞生长法:大多数细胞因子类 抑制细胞生长法:细胞毒素、血管抑制剂 间接保护细胞法:IFN 保护 WISH 3、酶学基础的活性测定:重组酶类 4、受体-配体、抗原-抗体结合基础的活性测定: 抗原决定簇与活性中心常不一致 (三)生物学活性测定方法选择 1 、细胞培养法>离体器官法>体内法 2、细胞染色标记方法: MTT >3H-Thymidine >流式细胞仪 (测细胞周期、凋亡) 3、定量法>半定量法>定性法 4、生物学活性不一定与临床药效类型一致 工艺稳定、测生物活性特别复杂时,可替代。 如 rh-GH 用 HPLC (四)生物学活性测定(见药典附录ⅩC) 1、样品:原液、成品 2、方法:如上述(好好研究????) 3、标准: 不同生物活性测定方法的规定标准 测定方法 规定标准 动物基础的活性测定 70%-130%标示量 细胞基础的活性测定 80%-120%标示量 酶学基础的活性测定 85%-115%标示量 结合反应的活性测定 85%-115%标示量 (五)蛋白质药物的比活性(见分生实验册 77 页)??? 1、样品:原液 2、定义与计算: 比活性:单位重量蛋白的活性单位数(IU/mg) 3、标准:不小于。。。IU/mg 4、意义: 1)真实反映有活性的蛋白质所占的比例 厂家间、表达系统间、批间比较 2)便于配制成品 二 蛋白质纯度检查 样品:原液 方法:必须采用二种方法测定 非还原 SDS-PAGE 法...