- 1 - 生物显微技术 第一章 1、生物显微技术：是应用各种光学显微镜或电子显微镜观察和辨认微小生物（动物、植物和微生物）的细胞形态及其显微、亚显微结构，也包括植物染色体技术与原位杂交等新的方法和技术。 2、列文虎克发明显微镜。 罗伯特胡克用自己设计与制造的显微镜（放大倍数为 40-140 倍)观察了软木（栎树皮)的薄片，第一次描述了植物细胞的构造，并首次用拉丁文 cellar（小室)这个词来称呼他所看到的类似蜂巢的极小的封闭状小室（实际上只是观察到到纤维质的细胞壁)。 第二章 1、材料采集注意事项：①选择新鲜的、健康的、有代表性的实验材料；②在保证材料完整的条件下，注意实验材料要“精而小”，而不是“大而多”；③注意实验材料的生长季节和发育时期；④选用刀刃锋利的刀片，切割时用力应均匀，避免组织破裂，影响制片效果；⑤实验材料选好后，应在极短的时间内杀死和固定。 2、切取纵切面时应注意使刀的切向与根茎的长轴方向平行。这种切面分为两种 ①、径切面 ②、切向切面（弦切面） 3、固定：应用某种方法以最快的速度，将生物细胞或组织杀死，投入某类化学药液中，借助化学药品的作用使细胞组织保持原来的形状与结构。 4、固定时的注意事项： ①材料新鲜：组织采集与分割后须立即固定。否则时间相隔过久，体积就要收缩变形或发生自溶现象。一般以神经、造血组织自溶速度较快，胰腺、胃肠道的粘膜亦较易发生改变。 ②防止变形：对一些柔嫩或薄的材料如神经、肠系膜等，应先平铺于吸水纸上再固定，可防止因蛋白质凝固而引起的扭转变形。对含气而浮于液体表面的组织如肺等，可缚以重物使其下沉，或吸出肺内气体，使其下沉于固定剂内。 ③固定剂用量：一般为组织体积的 10~20 倍。避免组织内水分在固定时渗出，影响固定剂的浓度。勿使组织贴于瓶底或瓶壁，以免影响固定剂的渗入。在平时往往用棉花垫以瓶底，而使固定剂能均匀地渗入。 ④固定时间：根据组织的不同种类、性质、大小，固定剂种类、性质、渗透力的强弱而定。有的需要1~2h 至 10~20h，有的长达几天。一些小的材料，仅需几十分钟。某些固定剂（如Carnoy）对组织的硬化作用较强，固定时间不宜过长；但有些固定剂（如 Bouin）固定时间稍长也无关系，一般固定 24h 左右即可。 固定时间的长短与温度也有密切关系。增加温度虽可缩短固定时问，但对组织变化较大，一般并不采用。 ⑤避免阳光：尽可能避免接触阳光以免引起化学变化失去固定作用...
