2 目录 （一） 介绍 4 （二） 试剂盒物品清单 7 （三） 额外附加物品列表 9 （四） 酵母菌株 11 （五） 酵母载体 14 （六） 方法简述：单杂交文库的构建和筛选 16 方法简述：双杂交文库的构建和筛选 17 （七） 构建用于酵母单杂交的报告质粒载体 18 （八） 构建用于酵母双杂交的DNA-BD 融合载体 19 （九） 构建生成cDNA 文库 21 （十） 构建和筛选酵母单杂交和双杂交文库（简述） 27 （十一） 酵母单杂交文库的构建和筛选 28 （十二） 酵母双杂交文库的构建和筛选 30 方法A:通过酵母配对（Yeast Mating）来筛选目的蛋白 30 方法B:通过共转化的方法筛选目的蛋白 35 （十三） 分析阳性相互作用结果 38 （十四） 问题解决指南 44 （十五） 参考文献 47 （十六） 相关产品 50 附录A: 双链 cDNA 合成的典型结果 51 附录B: 酵母感受态的制备—LiAc 法 52 附录C： 单杂交对照载体信息 53 附录D： 双杂对照载体信息 54 表格列表 Table I． BD Matchmaker 酵母菌株的基因型 11 Table II． BD Matchmaker 酵母菌株的表型 11 Table III．单杂交系统的载体 14 Table IV． 双杂交系统的载体 15 Table V． 各 BD-Matchmaker DNA-BD 载体的比较 19 Table VI． RNA 起始浓度和PCR 扩增循环数之间的关系 24 Table VII．单杂交共转化的对照实验的设置 29 Table VIII．单杂共转化对照实验：期望的结果 29 Table IX． 双杂交转化的对照实验的设置 33 Table X． 双杂交配对筛选的对照实验的设置 Table XI． 双杂交共转化的对照实验的设置 Table XII． 双杂交共转化的对照实验：期望的结果 Table XIII． 用于PCR 筛选菌落的Assembling Master Mixs 3 图片列表 Figure 1．使用BD Matchmaker 单杂交系统筛选蛋白-DNA 相互作用 4 Figure 2．使用BD Matchmaker 单杂交系统筛选蛋白-蛋白相互作用 4 Figure 3．酵母单杂交和双杂交筛选的大致步骤 5 Figure 4．构建和筛选BD Matchmaker 酵母单杂交和双杂交文库 6 Figure 5．酵母菌株AH109 和Y187 中的报告基因 12 Figure 6．BD Matchmaker 酵母单杂交文库的构建和筛选 16 Figure 7．BD Matchmaker 酵母双杂交文库的构建和筛选 17 Figure 8．用BD SMART 技术合成高质量的ds cDNA 21 Figure 9．BD CHROMA SPIN 纯化柱和收集管 26 Figure ...
