ELISA 基 础 知 识 ELISA 原 理 与 分 类 1. ELISA 的 原 理 ELISA 的 基 础 是 抗 原 或 抗 体 的 固 相 化 及 抗 原 或 抗 体 的 酶 标 记 。 结 合 在 固 相 载 体 表 面 的 抗 原或 抗 体 仍 保 持 其 免 疫 学 活 性 ， 酶 标 记 的 抗 原 或 抗 体 既 保 留 其 免 疫 学 活 性 ， 又 保 留 酶 的 活 性 。在 测 定 时 ， 受 检 标 本 （ 测 定 其 中 的 抗 体 或 抗 原 ） 与 固 相 载 体 表 面 的 抗 原 或 抗 体 起 反 应 。 用洗 涤 的 方 法 使 固 相 载 体 上 形 成 的 抗 原 抗 体 复 合 物 与 液 体 中 的 其 他 物 质 分 开 。 再 加 入 酶 标 记的 抗 原 或 抗 体 ， 也 通 过 反 应 而 结 合 在 固 相 载 体 上 。 此 时 固 相 上 的 酶 量 与 标 本 中 受 检 物 质 的量 呈 一 定 的 比 例 。 加 入 酶 反 应 的 底 物 后 ， 底 物 被 酶 催 化 成 为 有 色 产 物 ， 产 物 的 量 与 标 本 中受 检 物 质 的 量 直 接 相 关 ， 故 可 根 据 呈 色 的 深 浅 进 行 定 性 或 定 量 分 析 。 由 于 酶 的 催 化 效 率 很高 ， 间 接 地 放 大 了 免 疫 反 应 的 结 果 ， 使 测 定 方 法 达 到 很 高 的 敏 感 度 。 2. ELISA 的 类 型 ELISA 可 用 于 测 定 抗 原 ， 也 可 用 于 测 定 抗 体 。 在 这 种 测 定 方 法 中 有 三 个 必 要 的 试 剂 ： （ 1）固 相 的 抗 菌素原 或 抗 体 ， 即"免 疫 吸附剂 "（ immu nosorbent） ；（ 2） 酶 标 记 的 抗 原 或 抗 体 ，称为 "结 合 物 "（ conju gate） ；（ 3） 酶 反 应 的 底 物 。 根 据 试 剂 的 来源和标 本 的 情况以及 检测 的 具体 条件， 可 设计出各种 不同类 型 的 检 测 方 法 。 用 于 临床检 验的 ELISA 主要 有 以下几种 类 型 ： 2.2.1 双抗 体 夹心法 测 抗 原 双抗 体 夹心法 是 检 测 抗 原 最常用 的 方 法 ， 操作步骤如下： 1） 将特异性 抗 体 与 固 相 载 体 ...
