V Y SIS 说 明 书 试 验 程 序 原 理 21 黄 Y 黄 X 绿 在 原 位 杂 交 X 绿 光 探 针 centromerregion 是 一 种 在 一 个 细 胞 标 本 里 能 看 见 特 定 的 核 酸 序 列 (尤其 是 DNA)的 技 术 , (FISH) 包 括 精 确 的 单 股 荧 光 标 记DNA 探 针 的 退 火 与 目 的 基 因 互 补
探 针 荧 光 的DNA 位点 能 通 过 直 接 的 检 测 用 荧 光 显 微 镜 看 到
羊 水 标 本 包 括 间 期 细 胞 用 标 准 的 细 胞 遗 传 学 方 法 附 着 在 玻 片 上
样 本 标 本 DNA 变 性 , 然 后 与 CEP x /y and LSI 21 探 针 杂 交
在 杂 交 后 , 多 余 的 和 未 结 合 的 探 针 被 一 系 列 洗 涤 所 除 掉
染 色 体 和 核 DNA 用 特 殊 的 染 料 被 复 染 , 复 染 剂 DAP 发 蓝 光
用 装 上 适 合 的 激 动 剂 与 发 射 滤 器 的 荧 光 显 微 镜 观 察 CEP X/Y 和 LSI 21 DNA 探 针 杂 交 , 能看 到 强 烈 的 橘 黄 光 和 绿 色 的 荧 光 信 号 和 蓝 色 的 复 染 核
通 过 显 微 镜 检 查 21 X, and Y 染 色 体 点 计 , 荧 光 染 色 区域明 亮地突出于核 的 DNA 普通 的蓝 色 荧 光 (通 过 DAPI 复 染 )
FISH 程 序 能 使核 的 21,X,and Y 染 色 体 点 计 可见
CEP X/Y DNA 探 针 是 一 种 绿 光 和 橘 黄 光 混合 物, 直 接 标 记 荧 光 的 DNA 探 针 , 分别在 X 和Y 染 色 体 的 DXZ1