V Y SIS 说 明 书 试 验 程 序 原 理 21 黄 Y 黄 X 绿 在 原 位 杂 交 X 绿 光 探 针 centromerregion 是 一 种 在 一 个 细 胞 标 本 里 能 看 见 特 定 的 核 酸 序 列 (尤其 是 DNA)的 技 术 ， (FISH) 包 括 精 确 的 单 股 荧 光 标 记DNA 探 针 的 退 火 与 目 的 基 因 互 补 . 探 针 荧 光 的DNA 位点 能 通 过 直 接 的 检 测 用 荧 光 显 微 镜 看 到 。 羊 水 标 本 包 括 间 期 细 胞 用 标 准 的 细 胞 遗 传 学 方 法 附 着 在 玻 片 上 。 样 本 标 本 DNA 变 性 ， 然 后 与 CEP x /y and LSI 21 探 针 杂 交 。 在 杂 交 后 ， 多 余 的 和 未 结 合 的 探 针 被 一 系 列 洗 涤 所 除 掉 。 染 色 体 和 核 DNA 用 特 殊 的 染 料 被 复 染 ， 复 染 剂 DAP 发 蓝 光 . 用 装 上 适 合 的 激 动 剂 与 发 射 滤 器 的 荧 光 显 微 镜 观 察 CEP X/Y 和 LSI 21 DNA 探 针 杂 交 ， 能看 到 强 烈 的 橘 黄 光 和 绿 色 的 荧 光 信 号 和 蓝 色 的 复 染 核 。 通 过 显 微 镜 检 查 21 X, and Y 染 色 体 点 计 ， 荧 光 染 色 区域明 亮地突出于核 的 DNA 普通 的蓝 色 荧 光 (通 过 DAPI 复 染 ) . FISH 程 序 能 使核 的 21,X,and Y 染 色 体 点 计 可见 。 CEP X/Y DNA 探 针 是 一 种 绿 光 和 橘 黄 光 混合 物， 直 接 标 记 荧 光 的 DNA 探 针 ， 分别在 X 和Y 染 色 体 的 DXZ1 和 DYZ3 区。 LSI 21 DNA 探 针 是 一 种 橘 黄 色 光 直 接 标 记 的 荧 光 DNA 探 针 ， 包 含特 异性 DNA 序 列 对应位 于21 号 染 色 体 21q22.13 到 21q22.2 区的 D21S259 和 D21S342 基 因 座. 所 有探 针 混合 物都在 杂 交 缓冲液中经过 了预变 性 以便于应用 。 本 试 验 设计 目 的 是 用 荧 光 原 位 杂 交 法 探 测 和 量化21,X,and Y 染 色 体 。 试 剂 和 仪器 提供的 材料 本 试 剂 盒包 括 四种 试 剂 ， 够约20 次测 试 。 成分 组成 容...
