JacksonImmunoResearch公司二抗选用指南

Jackson Immu noResearch 公司二抗选用指南 (此部分内容来源于Jackson Immu noResearch Laboratories Inc 网站，如有疑问，请参考原网站） 亲和层析法纯化的二抗 用亲和层析法纯化的抗体是指，利用耦联到琼脂糖凝胶上的抗原将抗血清中的抗体亲和层析下来。我们采用一种特有的连续的洗脱过程将抗体从固态抗原上分离出来。我们提供的未标记的亲和层析法纯化的抗体是不含有稳定剂和防腐剂的无菌液体。耦联标记物的抗体是冻干粉，里面含有稳定剂和防腐剂，但是过氧化物酶标记的抗体里面不含防腐剂。 (下面内容中的页码指的是Jackson 2006 年原版目录中的页码） 亲和层析纯化抗体的选择和定位 第一步：选择Who le IgG（8－17 页）、F(ab’)2 片段（18－22 页），或者Fab 片段（23－25）抗体。 我们提供三种亲和纯化的抗体：Whole IgG，F(ab’)2 片段，Fab 片段。 Who le IgG（8－17 页）抗体是从抗血清中分离出来的完整的分子。这些抗体有一个 Fc 部分和两个与抗原结合的Fab 部分，因此是二价的。Whole IgG 抗体适用于多数情况（见F(ab’)2 片段、Fab 片段的特例），也是性价比最高的。 F(ab’)2 片段（18－22 页）抗体是用胃蛋白酶消化IgG 去除Fc 部分，剩下两个靠二硫键连接的结合抗原的Fab 部分（依然是二价的）。这些抗体用在特定的情况中，例如避免抗体与 Protain A 或 G结合，或者与有Fc 受体的活细胞结合。但是，如果一抗是w hole IgG，不管二抗是哪 种形 式 都 可 能出现 结合 Fc 受体。这时 ，为 了 阻 止 抗体结合到Fc 受体上，可 以 在4 度 将细胞预 培 养 于含有叠 氮 钠和二抗来源物种正 常 血清的缓 冲 液中。 注意：当使用的是带标记的二抗时，千万不能用一抗来源物种的正常血清和 IgG 来封闭。如果血清中的免疫球蛋白非特异性的结合到样品上，他们会被带有标记的二抗识别，导致背景过高。 Fab 片段（23－25 页）抗体是用木瓜蛋白酶消化 IgG 后得到的。这些抗体只含有一个结合位点。它们用来封闭内源性的免疫球蛋白，或者在使用相同物种来源的一抗作多标记的实验中，用于封闭暴露的免疫球蛋白。 第二步：在左边标记“antibody description”的拦里找到一抗的物种来源。 抗体是根据一抗的物种来源的字母表顺序排列。比如，如果一抗是小鼠来源的，就找“anti-mou se”。 说明：目录中提供了抗叙利亚仓鼠和抗亚美尼亚仓鼠的抗体。为了正确的选...