观察结.word..抗菌药物最小抑菌浓度的测定一、概念：最小抑菌浓度〔minimuminhibitoryconcentration,MIC〕：在特定环境下孵育 24 小时，可抑制某种微生物出现明显增长的最低药物浓度即最小抑菌浓度，用于定量测定体外抗菌活性。二、实验目的：通过采用常量稀释法,检测几种抗菌药物对菌株的最小抑菌浓度(MIC),对临床诊断用药有指导作用。三、仪器和试剂：MH 液体培养基无菌试管分光光度计0.5 麦氏标准比浊管MH 琼脂微量加样器蒸馏水吸头0.1mol 磷酸缓冲液〔PH6.0〕接种环无菌生理盐水无菌平板无菌滤膜 0.22无菌针筒金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌抗菌药物四、检验方法：液体稀释法、琼脂稀释法、E 试验〔Etest〕液体稀释法操作步骤：抗菌药物原液配置OOOOOOOOOOOOOMH 液体试管中抗菌药物梯度稀释.word..1..抗菌药物原液制备抗菌药物贮存液浓度不应低于 1000ug/ml(如 1280ug/ml)或 10 倍于最高测定浓度。溶解度低的抗菌药物可稍低于上述浓度。所需抗菌药物溶液量或粉剂量可公式进展计算。例如：需配制 100ml 浓度为 1280iag/ml 的抗生素贮存液，所用抗生素为粉剂，其药物的有效力为 750pg/mgo用分析天平准确称取抗生素粉剂的量为182.6mgo 根据公式计算所需稀释剂用量为：〔182.6mgx750pg/ml]/1280Mg/ml=107.0ml，然后将182.6mg 抗生素粉剂溶解于 107.0ml 稀释剂中。制备抗菌药物贮存液所用的溶剂和稀释剂见表 1。配制好的抗菌药物贮存液应贮存于-20°C 环境，并注意抗菌药物的保存期限。表 1 稀释法中常用的抗菌药物容积稀释法药物浓度取药液量 加稀释剂量药物稀释浓琼脂或肉汤中最后含药浓度〔ug/ml〕〔ml〕〔ml〕度〔ug/mD〔ug/ml〕药物：琼脂〔或肉汤=1：95120105120512512011256025651201312801281280116406412801332032128017160161601180816013404160172022011101201350.520172.50.25.word..2.5111.250.1252.5130.60.062.5170.30.032•药敏试验用抗菌药物浓度 X 围根据 NCCLS 抗菌药物敏感性试验操作标准，药物浓度 X 围应包含耐药、中介和敏感分界点值，特殊情况例外。3•培养基 NCCLS 推荐使用 Mueller-Hinton〔MH〕肉汤,pH7.2~7.4。需氧菌及兼性厌氧菌在此培养基中生长良好。在测试葡萄球菌对苯唑西林的敏感性时，应在肉汤中参加 2%〔W/V〕氯化钠，按制造厂家的要求配制需要量的 MH 肉汤。嗜血杆菌属菌使用 HTM 肉汤，肺炎链球菌和其它链球菌使用含 2%~5%溶解马血的 MH 肉汤。4.接...
