专题二 细胞代谢 专题聚焦四 光与光合作用 一、叶绿体中色素的种类、提取与分离 1. 叶绿素和其他色素 色素种类 叶绿素(3/4) 类胡萝卜素(1/4) 叶绿素 a 叶绿素 b 胡萝卜素 叶黄素 颜色 蓝绿色 黄绿色 橙黄色 黄色 分布 叶绿体基粒的囊状结构薄膜上 吸收光谱 叶绿素 a和叶绿素 b主要吸收蓝紫光和红光,类胡萝卜素(胡萝卜素和叶黄素)主要吸收蓝紫光 化学特性 不溶于水,能荣誉酒精、丙酮和石油醚等有机溶剂 分离方法 纸层析法 2.叶绿体中色素的提取和分离 (1)原理: 提取:叶绿体中的色素易溶于有机溶剂而不溶于水,将叶片磨碎后可用无水乙醇等有机溶剂提取色素。 分离:层析也是一种脂溶性很强的有机溶剂,不同色素在层析液中的溶解度不同:溶解度打的在滤纸上扩散得快,溶解度小的随层析液在滤纸上扩散得慢。因此,叶绿体中的色素就在扩散过程中被分离出来。 (2)实验中集中化学物质的作用 ① 无水乙醇:作为提取液,可溶解绿叶中的色素。 ② 层析液:用于分离色素。 ③ 二氧化硅:破坏细胞结构,使研磨充分。 ④ 碳酸钙:中和研磨过程中释放出的酸性物质,从而防止叶绿体中的色素被破坏。 (3)实验流程 步骤 操作要点 说明 提 取 色素 加少许SiO2和 CaCO3、10mL无水乙醇,迅速研磨并用单层尼龙布过滤 ①加SiO2为了研磨得更充分; ②加CaCO3防止研磨时叶绿素受到破坏 制备滤纸条 在剪去两角的滤纸条一端1cm处用铅笔画一条细线 剪去两角以保证色素在滤纸上扩散均匀、整齐,否则会形成弧形色素带 画滤 液细线 用毛细吸管吸取色素滤液,沿铅笔线均匀画一条滤液细线,待滤液干后再画一两次 ①滤液细线要细、直 ②干燥后重复画一两次,既使滤液细线有较多的色素,又使各色素扩散的起点相同 色 素 分离 将适量层析液倒入试管→插入滤纸条→棉塞塞紧试管口 层析液一定不能没过滤液细线 观 察 结果 滤纸条上呈现四条颜色、宽度均不相同的色素带 色素带由上至下:胡萝卜素(最细)、叶黄素(二细)、叶绿素 a(最粗)、叶绿素 b(次粗) (4)叶绿体色素提取分离实验异常现象分析: ① 收集到的滤液绿色过浅的原因分析: a 未加石英砂(SiO2),研磨不充分。 b 使用放置数天的菠菜叶,色素太少。 c 一次加入大量的无水乙醇,提取浓度太低(正确做法:分次加入少量无水乙醇提取色素) d 未加CaCO3或加入过少,色素分子被破坏。 ②滤纸条色素带重叠:滤纸条...