免疫组织化学考题 2004 级考题 1.简述原位杂交组织化学的基本原理。P84 2.简述免疫组化染色 ABC 法的基本原理。P52 3.组织块进行固定的原理是什么?常用的固定方法和固定剂有哪些?P10 4.何为细胞培养术?举例说明其在生物学医学研究中的应用. 5.细胞凋亡的形态学检测方法有哪些? 6.何为色温?在显微摄影中常用日光型胶片在灯光下拍照,您将用何种方法调节色温?P184 7.何为像素？在数码摄影中常考虑的参数是什么？P136;P198 8.酶标抗体免疫细胞化学间接法的基本原理是什么？此法的优缺点是什么？按此方法选择抗体时应注意什么问题？P51 9.结合本专业的研究方向，自行设计一个双重免疫荧光细胞化学染色的实验，并写出实验流程，简述免疫荧光细胞化学染色中的注意事项。 10.学过此门课程后有何感想？为使此课程开设的更好，请留下您宝贵的意见和建议。 2007 级考题 1.简述形态学研究有哪些主要常用技术？这些技术能解决哪些问题？ 2.试述石蜡切片和 HE 染色的基本制备过程，并指出制备免疫组化的石蜡切片和用于HE 染色的石蜡切片有何不同。P11;P207;P208 3.上课留的作业 4.何谓免疫荧光染色，用何种方法消除非特异荧光？P44;P74 5.ANN VASSAY 检测细胞凋亡的原理、试验流程和结果分析。 答：原理：主要是根据细胞凋亡过程中的形态特征改变，细胞膜的改变是这些特征中较早出现的一种。在凋亡细胞中，细胞膜磷脂酰丝氨酸（PS）从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的外侧。Annexin-V 是一种 35-36KD 的钙离子依赖的磷脂结合蛋白，它对PS 具有较高的亲和力。细胞凋亡时，可以和外翻的 PS 结合，从而可以检测凋亡的细胞。发生死亡的细胞其细胞膜上的 PS 也外翻，因而也会阳性。因此，还会加一种 DNA 染料，常用的有 P1。由于死亡的细胞膜通透性增高，染料可以进入细胞内和 DNA 结合，从而可以发荧光，区分出死细胞。试验流程：1）细胞收集：悬浮细胞直接收集10ml 的离心管中，而贴壁细胞先用滴管轻轻吹打。凋亡细胞一经吹打可能脱壁，收集到10ml 的离心管中，没脱壁的细胞用 0.02%的 EDTA消化使之脱壁，每样本细胞数为（1-5）×106，500~1000r/min 离心5min 弃去培养液。2）用孵育缓冲液洗 1 次，500~1000r/min 离心5min。3）用 100μ l 的标记溶液重悬细胞，室温下避光孵育 10~15min。4）500~1000r/min 离心5min 沉淀细胞，孵育缓冲液洗 1 次。5）加入荧光溶液 4℃下孵育 20min，避光并不时振动，上机检测...
