精品文档---下载后可任意编辑DFFA 和 PSMC3 在 RNA 干扰功能中的调控作用的开题报告背景:RNA 干扰是一种机制,其中小的 RNA 分子介导了基因沉默或抑制。RNA 干扰通常涉及两个互相关联的步骤:小 RNA 介导的剪切或调控mRNA 的翻译或降解,以及直接抑制转录。在小 RNA 介导的 RNA 干扰过程中,Dicer 的角色很关键,它可将到达细胞的 dsRNA 分子切割成长度约为 21-23 碱基的小 RNA(siRNA 或 miRNA)。siRNA、miRNA 和piRNA 都能够介导 RNA 干扰进程。最近的讨论表明,在这些过程中,DFFA 和 PSMC3 也发挥了重要的作用,但它们的具体作用机制目前还不够清楚。目的:本讨论的目的是探究 DFFA 和 PSMC3 在 RNA 干扰调控中的作用机制,特别是其如何参加 RNA 干扰网络中的信号转导与调控。方法:本讨论将采纳 CRISPR-Cas9 技术对 DFFA 和 PSMC3 进行基因敲除,同时利用 Western blot 和 RT-PCR 等技术对敲除细胞和对比细胞的基因和蛋白表达进行比较分析。此外,本讨论还将对敲除细胞和对比细胞实施 RNA 干扰,并对 RNA 干扰后的表达谱进行测定,以讨论 DFFA 和PSMC3 在 RNA 干扰过程中的调控作用。预期结果:我们估计,DFFA 和 PSMC3 基因敲除后,RNA 干扰的效率会降低。同时,我们还将重点讨论 DFFA 和 PSMC3 在 RNA 干扰过程中的表达调控的分子机制,包括其与 Dicer、Ago 蛋白等 RNA 干扰反应中间因子的关系。意义:本讨论的意义在于揭示 DFFA 和 PSMC3 在 RNA 干扰过程中的作用机制,为 RNA 干扰技术的进一步应用提供理论基础和实验依据。另外,本讨论还能够为基因治疗、肿瘤治疗等领域的相关讨论提供参考价值。