精品文档---下载后可任意编辑HBV 拉米夫定耐药基因结构与功能的讨论及感染性克隆的建立的开题报告讨论背景和意义：乙型肝炎病毒（HBV）感染是全球公共卫生问题，近年来由于高效的抗病毒治疗，HBV 感染的治愈率已经大大提高。当前抗病毒治疗的主要药物是核苷酸类似物类药物，其中拉米夫定（lamivudine）是一种安全而有效的抗 HBV 药物，但在长期使用过程中也会出现耐药性问题。目前，拉米夫定耐药基因结构和机制的讨论，以及相应的抗病毒药物的研发，已成为世界范围内的讨论热点。同时，HBV 感染性克隆的建立是开展强有力的基础与应用讨论的基础，为基础讨论和药物研发提供了有效的工具。讨论计划和方法：本讨论计划将从以下两方面开展讨论工作：1. HBV 拉米夫定耐药基因结构与功能的讨论采纳 PCR 扩增技术，从拉米夫定耐药性 HBV 感染者的血清样本中，扩增出 RT 基因的全部片段，再通过 DNA 序列分析技术，鉴定其基因突变点。基于此，构建带有相应基因突变点的慢病毒质粒，并进行细胞共转染，检测突变后病毒的体内及体外复制能力变化，分析其代谢机制和耐药特征。2. HBV 感染性克隆的建立从 HBV 携带者的血清样本中，提取 HBV DNA，并利用基因重组技术，构建 HBV 感染性克隆。通过检测 HBV 感染性克隆的 Viral titer、DNA 含量和感染效率等指标，验证其感染能力，建立 HBV 感染性克隆库。讨论预期结果和意义：本讨论计划将对 HBV 拉米夫定耐药基因结构和机制进行深化讨论，为相关抗病毒药物的研发提供理论基础。同时，通过建立 HBV 感染性克隆库，能够为基础讨论和药物研发提供有力的工具，促进 HBV 相关讨论的深化开展，有望为防治 HBV 感染提供有效的科学依据。
