叶绿素的提取分离

华 南 师 范 大 学 实 验 报 告 学 生 姓 名 罗 玉 玲 学 号 20102501014 专 业 生 物 科 学 年 级 、班 级 10 科 四 课 程 名 称 植 物 生 理 学 实 验 实 验 项 目 植 物 生 理 学 第 一 次 实 验 实 验 类 型 □验 证 □设 计 □综 合 实 验 时 间 2012 年 11 月 8 日 实 验 指 导 老 师 叶 庆 生 、冷 佳 奕 实 验 评 分 叶 绿 体 色 素 的 提 取 、分离及理化性质的 鉴定 1. 实验目的 1.1 学会叶绿体色素提取和分离的方法。 1.2 了解叶绿体色素的荧光现象、皂化反应等理化性质。 2.实验原理 2.1 叶绿体中含有绿色素（包括叶绿素a 和叶绿素b）和黄色素（包括胡萝卜素和叶黄素）两大类，这两类色素都不溶于水，而溶于有机溶剂，故可用乙醇或丙酮等有机溶剂提取。 2.2 叶绿素是二羧酸酯，与强碱反应形成绿色的可溶性叶绿素盐，可与有机溶剂中的类胡萝卜素分开；在酸性或加温条件下，叶绿素卟啉环中的Mg2+可依次被H+和 Cu2+取代，形成褐色的去镁叶绿素和绿色的铜代叶绿素；叶绿素受光激发，可发出红色荧光，反射光下可见红色荧光。 3.实验器材和试剂 3.1 实验仪器与器具 研钵、漏斗、剪刀、、圆形滤纸、分光光度计、电子天平、量筒、移液管、滴管、试管、试管架、酒精灯等 3.2 实验试剂 丙酮、石英砂、碳酸钙、四氯化碳、无水氯化钠、乙醚等 3.3 实验材料 勒杜鹃叶片 4.实验步骤 4.1 叶绿素提取 取 2g 勒 杜 鹃 叶 片 去 掉 主 脉 ， 剪 碎 研磨 圆 形 滤 纸 过 滤 收 集 提 取 液 4.2 荧光现象观察 透 射 光 下 观 察 溶 液 颜 色 叶 绿 素 提 取 液 反 色 光 下 观 察 溶 液 颜 色 4.3 光对叶绿素的破坏作用 色 素 提 取 液 少 许 等 量 分 装 于 两 试 管 一 支 处 于 黑 暗 、另 一支 于 太 阳 光 下 经 2h 后 观 察 两 支 试 管 的 颜 色 4.4 铜代反应 取 一 支 作 为 对 照 各 取 色 素 提 取 液 2m l 于 两 支 试 管 中 取 另 一 支 变 褐 色 后 观 察 颜 色 的 变 化 4.5 皂化反应 取 色 素 提 取 液 10m L 于 分 液 漏 斗 摇 匀 沿漏 斗 边 缘 加 入 30m L 蒸 馏 水 轻 轻 摇 动 静 置 分 层 加 入 20m L 丙 ...