精品文档---下载后可任意编辑NKG2D 介导的同种异体 NK 细胞对人脑胶质瘤细胞杀伤效应的实验讨论的开题报告一、选题背景和意义脑胶质瘤是最常见的脑部肿瘤之一，治疗难度大，预后较差，在治疗过程中往往伴随着严重的神经系统功能损害，给患者带来了极大的困扰。目前用于治疗脑胶质瘤的手段主要是手术切除、放疗和化疗，但是这些治疗手段具有一定的局限性，需要寻找新的治疗方法。天然杀伤(NK)细胞是一类免疫细胞，具有广泛的抗肿瘤和杀伤病毒感染的能力。一项讨论表明，在人类脑胶质瘤中，NK 细胞的数量和活性都较低。因此，调节和提高 NK 细胞的活性，增强 NK 细胞对肿瘤细胞的杀伤能力，有望成为治疗脑胶质瘤的有效手段。NKG2D 是 NK 细胞表面的一种免疫受体，可以识别广泛分布在多种肿瘤细胞表面的 NKG2D 配体。因此，利用 NKG2D 来识别并杀伤肿瘤细胞，是目前一种非常热门的免疫疗法。本讨论将应用同种异体 NK 细胞与切除脑胶质瘤患者外周血单个核细胞(PBMC)经过处理后的脑胶质瘤细胞株进行体外实验，探究 NKG2D对同种异体 NK 细胞的杀伤效应，为拓展脑胶质瘤治疗手段提供实验基础依据。二、讨论内容和方案（一）讨论内容本讨论旨在探究 NKG2D 介导的同种异体 NK 细胞对人脑胶质瘤细胞的杀伤效应。具体内容包括：1.构建同种异体 NK 细胞和脑胶质瘤细胞株的体外共培育模型。2.利用 Western blot 等技术检测同种异体 NK 细胞中 NKG2D 的表达情况。3.采纳 MTT 法等细胞生物学方法，探究 NKG2D 介导的同种异体NK 细胞对脑胶质瘤细胞的杀伤效应。（二）讨论方案精品文档---下载后可任意编辑1.实验相关的仪器和试剂准备，包括 NK 细胞培育二氧化碳培育箱、体外细胞培育液、脑胶质瘤细胞株、Western blot 试剂盒、MTT 试剂盒等。2.同种异体 NK 细胞的筛选，通过检测细胞表面的 CD56 和 CD16等标记物，筛选出约 90％的同种异体 NK 细胞。3.构建同种异体 NK 细胞和脑胶质瘤细胞株的体外共培育模型，培育条件为 37℃、5%CO2/95%空气、无乳糖 RPMI1640 培育液。4.利用 Western blot 等技术检测同种异体 NK 细胞中 NKG2D 的表达情况，通过特异性抗体（如 anti-NKG2D antibody）实现检测。5.采纳 MTT 法等细胞生物学方法，探究 NKG2D 介导的同种异体NK 细胞对脑胶质瘤细胞的杀伤效应，比较同种异体 NK 细胞和脑胶质瘤细胞生长情况。6.对实验结果进行统计学分析。三、讨论预期结果1....
