精品文档---下载后可任意编辑RNA 干扰 survivin 基因表达对肝癌细胞放射敏感性影响的开题报告一、选题背景肝癌是一种恶性肿瘤,发病率和死亡率均较高。放疗是肝癌治疗中重要的手段之一,但由于放射抗性问题,放疗的治疗效果不尽理想。因此,探究放疗对肝癌细胞的作用机制,寻找新的治疗策略具有重要的意义。Survivin 是一种抗凋亡蛋白,与肿瘤的发生分化、凋亡和侵袭等密切相关。讨论表明,抑制 survivin 的表达可以增加肝癌细胞的放射敏感性。RNA 干扰技术可以精确地调控基因的表达,对肝癌治疗具有潜在的应用价值。因此,本课题旨在探究 RNA 干扰 survivin 基因表达对肝癌细胞放射敏感性的影响。二、讨论内容和方法讨论内容:1、设计 survivin 基因 RNA 干扰序列;2、构建 RNA 干扰表达载体;3、测定 RNA 干扰 survivin 基因表达效果;4、评估 RNA 干扰 survivin 基因表达对肝癌细胞的对放射敏感性影响;5、开展分子机制讨论。讨论方法:1、利用基因序列软件设计 survivin 基因 RNA 干扰序列;2、利用 PCR 技术扩增 RNA 干扰序列并将其克隆到 RNA 干扰表达载体中;3、利用 Western blot 技术检测 RNA 干扰 survivin 基因表达效果;4、利用 MTT、流式细胞术、免疫荧光等技术评估 RNA 干扰survivin 基因表达对肝癌细胞的对放射敏感性影响;5、利用 Real-time PCR 等技术分析 RNA 干扰 survivin 基因表达对肝癌细胞信号通路的影响。精品文档---下载后可任意编辑三、讨论意义本讨论可以为探究肝癌细胞抗放射的分子机制提供新的线索,为寻找新的抗肝癌治疗策略提供实验依据。同时,讨论结果有望为 RNA 干扰技术在肝癌治疗中的应用提供参考,为 RNA 干扰技术的进一步进展提供支持。