精品文档---下载后可任意编辑RNA 沉默 survivin 基因及其对启动子甲基化的影响的开题报告讨论背景和意义survivin 是一种在肿瘤细胞中高度表达的 IAP 蛋白，具有抗凋亡和促增殖的功能。因此，survivin 已成为肿瘤治疗中的重要靶点。RNA 干扰技术是一种有效的治疗肿瘤的方法之一，因为它能特异性地降低某一基因的表达，包括 survivin。而且，启动子甲基化是被认为是导致基因沉默的一种重要方式。因此，讨论 RNA 沉默 survivin 基因及其对启动子甲基化的影响的机制，对于深化理解 survivin 在肿瘤发生和进展中的作用，以及肿瘤治疗方面的推广应用都具有重要的意义。讨论内容和方法本讨论拟采纳 RNA 干扰技术对人肺癌 A549 细胞中 survivin 基因进行沉默，通过 Western blot 和 Real-time PCR 检测 survivin 蛋白和mRNA 的表达水平，验证 RNA 干扰的效果。同时，采纳甲基化特异性PCR（MSP）和甲基化敏感的限制酶切分析（MSRE）检测 survivin 基因启动子区域的甲基化状态，定量分析 survivin 启动子区域的甲基化水平的变化。最后，通过 CCK-8 试验和 Transwell 实验检测 RNA 干扰survivin 基因对 A549 细胞增殖和迁移的影响，以及甲基转移酶抑制剂5-Aza 对 RNA 干扰 survivin 基因的影响。讨论预期结果估计 RNA 干扰可有效地降低 A549 细胞中 survivin 的表达，同时，survivin 基因启动子区域的甲基化水平将发生显著的变化，且甲基转移酶抑制剂 5-Aza 可影响 RNA 干扰 survivin 基因的效果。最终，本讨论可深化探讨 survivin 基因在肺癌中的作用机制，为寻找治疗和预防肺癌的新靶点提供重要的理论依据。
